36第25卷第2期2023年2月辽宁中医药大学学报JOURNALOFLIAONINGUNIVERSITYOFTCMVol.25No.2Feb.，2023益气通络方含药血清通过减弱氧化应激反应和激活PI3K/AKT信号通路对PC12细胞氧化应激损伤模型的保护作用裴珍珍1，王革生2，东潇博2，杜勇2，宋光荣2，李蕊萍1，郑粲1，王清华1，郭蓉娟2（1.北京中医药大学，北京100105；2.北京中医药大学东方医院，北京100078）基金项目：国家中医药管理局国家中医临床基地业务建设科研专项（JDZX2015043）；北京中医药大学重点攻关项目（2020-JYB-ZDGG-129）作者简介：裴珍珍（1993-），女，河南商丘人，硕士在读，研究方向：中西医结合治疗脑血管疾病。通讯作者：王革生（1967-），男，北京人，主任医师、副教授，博士研究生导师，博士，研究方向：中西医结合治疗脑血管疾病。摘要：目的研究益气通络方含药血清对过氧化氢（H2O2）诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法①选取SPF级健康SD雌性大鼠20只，随机分为空白组及益气通络方组。分别使用生理盐水及益气通络方灌胃7d，后腹主动脉取血离心制备空白血清及含药血清。②体外培养PC12细胞，随机分为正常组、模型组、空白血清组、益气通络方含药血清组、PI3K抑制剂组、益气通络方含药血清+PI3K抑制剂组。除正常组外，H2O2体外诱导构建PC12细胞氧化应激损伤模型。试剂盒检测乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）含量和细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活力及活性氧（ROS）分布水平。蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测p-PI3K、p-AKT、AKT、Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果选择600μmol/LH2O2刺激4h作为氧化损伤造模条件。①与正常组相比，模型组LDH、MDA含量增高（P<0.01），SOD活力降低（P<0.01），ROS细胞内分布增加。与模型组相比，益气通络方含药血清组LDH、MDA含量降低（P<0.05），SOD活力增高（P<0.01），ROS细胞内分布减少。②与正常组相比，模型组p-PI3K、p-AKT/AKT降低（P<0.01），Bax/Bcl-2增高（P<0.01）。与模型组相比，益气通络方含药血清组p-PI3K、p-AKT/AKT增高（P<0.01），益气通络方含药血清能下调Bax/Bcl-2。与益气通络方含药血清组相比，加入PI3K抑制剂会显著抑制p-PI3K、p-AKT表达（P<0.01），增高Bax/Bcl-2，促进细胞凋亡。结论益气通络方能减轻氧化应激反应，上调PI3K/AKT信号通路，促进抗凋亡蛋白表达，抑制细胞凋亡途径，发挥细胞保护作用。关键词：脑缺血再灌注损伤；益气通络方；含药血清；细胞凋亡；PI3K/AKT通路中图分类号：R285.5文献标志码：A文...
