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阳春砂2个蒎烯合酶的催化功能和表达模式比较_凌旭怡.pdfVIP免费

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2023年2月第48卷第3期Vol.48,No.3February,2023[收稿日期]2022⁃07⁃22[基金项目]国家自然科学基金面上项目(81872954)[通信作者]∗杨锦芬,研究员,研究方向为药用植物萜类药效物质生物合成和代谢工程,E⁃mail:yangjf@gzucm.edu.cn[作者简介]凌旭怡,硕士研究生,研究方向为药用植物萜类药效物质生物合成和代谢工程,E⁃mail:1498421000@qq.com·分子生药学·阳春砂2个蒎烯合酶的催化功能和表达模式比较凌旭怡,林晓静,黄琳璇,杨鹏,杨锦芬∗(广州中医药大学中药学院岭南中药资源教育部重点实验室,广东广州511400)[摘要]阳春砂果实中含有丰富的挥发性萜类,其中蒎烯是其主要成分之一,且具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等广泛的药理活性。课题组前期通过GC⁃MS检测发现阳春砂果实中含有丰富的α⁃蒎烯,且克隆并鉴定了以β⁃蒎烯为主产物的萜类合酶(WvTPS63,原名AvTPS1),但以α⁃蒎烯为主产物的萜类合酶还未被鉴定。该研究基于阳春砂基因组数据,筛选发现与WvTPS63序列高度相似的WvTPS66,并对WvTPS66进行体外酶功能鉴定及与WvTPS63进行序列、催化功能、表达模式及启动子比较分析。多序列比对表明WvTPS63与WvTPS66的氨基酸序列高度相似且萜类合酶的保守motif基本一致。体外催化功能比较显示两者均能生成蒎烯,其中WvTPS63主产物为β⁃蒎烯,而WvTPS66的主产物为α⁃蒎烯。表达模式分析显示WvTPS63主要在花中高表达,WvTPS66在全株均有表达,且在果皮中表达量最高,表明其可能主要负责果实中α⁃蒎烯的合成。此外,对WvTPS63与WvTPS66启动子的分析显示二者启动子区域存在多个与胁迫响应相关的调控元件。以上研究结果可为萜类合酶基因的功能研究提供参考,也可为蒎烯的生物合成提供新的基因元件。[关键词]阳春砂;蒎烯合酶;α⁃蒎烯;功能鉴定;表达模式ComparisonofcatalyticfunctionsandexpressionpatternsoftwopinenesynthasesfromWurfbainiavillosaLINGXu⁃yi,LINXiao⁃jing,HUANGLin⁃xuan,YANGPeng,YANGJin⁃fen∗(KeyLaboratoryo...

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