病毒学报CHINESEJOURNALOFVIROLOGYVol.39No.2March2023第39卷第2期2023年3月抗SARS⁃CoV⁃2S蛋白IgM单克隆抗体的表达及鉴定张瑞雪1，殷强玲2，黄涛1，钱振3，芜为1，王世文1，梁米芳1，孙丽娜1*，王晓芳1*（1.中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，北京102206；2.湖北省疾病预防控制中心，武汉430079；3.安徽医科大学基础医学院微生物学教研室，合肥230032）摘要：为了寻求SARS‐CoV‐2IgM抗体阳性血清质控品的替代品，本研究成功表达纯化出抗SARS‐CoV‐2S蛋白IgM单克隆抗体。研究确定了IgM单克隆抗体最佳表达载体为含增强子sp163和信号肽2的组合以及第5d为目的蛋白收获的最佳时间。此外在研究J链的作用时发现转染细胞时不添加J链（nCoV‐163‐IgM3）的表达量明显高于添加J链（nCoV‐163‐IgM3J）时的表达量，J链对蛋白稳定性也无明显影响，且nCoV‐163‐IgM3和nCoV‐163‐IgM3J抗原结合活性之间的差别无统计学意义（P>0.05），nCoV‐163‐IgM3和nCoV‐163‐IgM3J对本研究所检测的WT‐S1、Alpha‐S1、Beta‐S1、Delta‐S1、Omicron‐S1、BA.2‐S1、BF.7‐RBD、XBB.1‐S1、BQ1.1‐S1等九种抗原均有结合活性，只有一株（BA.2.75‐RBD）逃逸。纯化后的目的蛋白经还原剂（β‐ME）还原后显示重链分子量大小为70kD左右，轻链分子量大小为25kD左右。目的蛋白均可与新型冠状病毒抗体检测试剂盒（胶体金，INNOVITA）、SARS‐CoV‐2S蛋白IgM抗体酶联免疫吸附测定试剂盒（Elabscience）、抗SARS‐CoV‐2S‐RBD蛋白人IgM抗体酶联免疫吸附测定试剂盒（Proteintech）等三种试剂盒反应。关键词：SARS‐CoV‐2；IgM单克隆抗体；J链；重组蛋白中图分类号：R392.7R373.1文献标识码：A文章编号：1000‐8721（2023）02‐0305‐08DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004291截至2022年10月18日，WHO报告全球范围内已经有622389418例新型冠状病毒（SARS‐CoV‐2）引发的肺炎疫情确诊病例，包括6548492人死亡，使其成为自1918年流感大流行以来最严重的疾病大流行。早发现、早诊断、早治疗新型冠状病毒感染（Coronavirusdisease2019，COVID‐19）患者是及时阻断疫情传播的关键。《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案（试行第七版）》已将血清SARS‐CoV‐2IgM和IgG抗体检测纳入确诊方法之一，血清抗体检测用作新冠病毒核酸检测的补充检测，也可用于评估疫苗接种后诱发的免疫反应。截至2022年12月6日，全球疫苗接种已超过130.3亿剂次，我国89.27%的人口已完成全程接种，2.23%...
