中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２７１７—２０１０马传染性贫血检疫技术规范犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲狆狉狅狋狅犮狅犾犳狅狉犲狇狌犻狀犲犻狀犳犲犮狋犻狅狌狊犪狀犲犿犻犪２０１０１１０１发布２０１１０５０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布前言本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局。本标准主要起草人：朱来华、梁成珠、郑小龙、邓明俊、肖西志、岳志芹、辛学谦、孙涛、王群。Ⅰ犛犖／犜２７１７—２０１０马传染性贫血检疫技术规范１范围本标准规定了马传染性贫血的临床诊断、病毒分离鉴定、酶联免疫吸附试验、琼脂凝胶免疫扩散试验等检疫技术。本标准适用于马属动物马传染性贫血的检疫和诊断。２规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ６６８２分析实验室用水规格和试验方法ＧＢ／Ｔ１７４９４马传染性贫血病间接ＥＬＩＳＡ诊断技术３临床诊断３．１临床特征马传染性贫血（ＥＩＡ）特征性症状及病理变化表现为高热稽留（３９℃以上）、或间歇热（持续高热３ｄ～５ｄ，经３ｄ～１５ｄ常温间歇期又复发）、或出现温差倒转现象；在舌底、口腔、鼻腔、阴道粘膜及眼结膜等处，常见鲜红色至暗红色出血点（斑）等；贫血、黄疸、心脏衰弱、浮肿和消瘦等特征性症状及病理变化。３．２判定根据特征性症状及病理变化（见３．１）可做出初步诊断。进一步确诊应采集病料或血清样品进行实验室检查。４实验室检测方法４．１病毒分离鉴定４．１．１试验材料细胞培养瓶（８０ｍＬ），赛氏液、细胞生长液、阿氏液、驴外周血白细胞制备见附录Ａ。实验室用水按照ＧＢ／Ｔ６６８２规定。４．１．２病料采集与处理无菌采集被检马属动物的抗凝血，在室温放置３０ｍｉｎ～４０ｍｉｎ，收集中间淡黄色的白细胞层，每管分装５００μＬ，４０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，弃上清液，白细胞沉淀－８０℃保存备用。４．１．３细胞培养按附录Ａ制备驴外周血白细胞，加入细胞生长液后培养１ｄ～２ｄ后，如细胞已贴壁并伸出突起，即可接种病料。１犛犖／犜２７１７—２０１０４．１．４病料接种在倾弃细胞培养液后，接种病料５００μＬ，３７℃吸附１ｈ～２ｈ后吸...
