中华人民共和国出入境检验检疫行业标准�������������裂谷热检疫技术规范����������������������������������������������发布����������实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布前言本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局。本标准主要起草人：鱼海琼、鄢志强、林志雄、罗长保、林祥梅、韩雪清、罗琼、田纯见、梁刚。Ⅰ犛犖／犜２７０７—２０１０裂谷热检疫技术规范１范围本标准规定了裂谷热病毒分离鉴定技术、微量血清中和试验方法、酶联免疫吸附试验方法和血凝抑制试验方法的技术要求。本标准适用于裂谷热的检疫。２规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ１８０８８出入境动物检疫采样ＧＢ１９４８９实验室生物安全通用要求３缩略语下列缩略语适用于本文件。ＢＨＫ：仓鼠肾细胞ＣＥＲ：鸡胚网状组织细胞ＣＰＥ：细胞病变ＯＤ：光密度ＰＢＳ：磷酸盐缓冲液ＲＮＡ：核糖核酸ＲＶＦ：裂谷热ＴＣＩＤ５０：组织培养半数感染量Ｖｅｒｏ：非洲绿猴肾细胞４临床诊断根据裂谷热临床症状和发病机理（参见附录Ａ）做出初步诊断，确诊还需进行实验室诊断。５实验室诊断警告：涉及传染性材料和病毒的部分要严格按照犌犅１９４８９的要求操作。５．１病毒分离和鉴定５．１．１材料５．１．１．１荧光显微镜。５．１．１．２二氧化碳培养箱。１犛犖／犜２７０７—２０１０５．１．１．３２５ｃｍ２细胞培养瓶，９６孔平底细胞培养板，带盖湿盒。５．１．１．４无ＲＶＦ抗体胎牛血清，细胞分散液。５．１．１．５ＲＶＦ标准毒株和标准阳性、阴性血清，ＲＶＦ荧光抗体。５．１．１．６Ｖｅｒｏ细胞或ＢＨＫ细胞或ＣＥＲ细胞。５．１．１．７溶液及细胞培养液配制见附录Ｂ。５．１．２样品的采集按ＧＢ／Ｔ１８０８８规定，逐头进行采样，并按规定填写《送样单》送实验室。采集发热期动物的抗凝血５ｍＬ。对怀疑死于该病的动物采集死亡动物的肝脏、脾脏、大脑，流产胎儿５ｇ。５．１．３样品的处理血液用常规方法分离血清。死亡动物的肝脏、脾脏、大脑，流产胎儿经剪碎、研磨，加生理盐水，冻融两次，４℃过夜...
