中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖/犜2080—2008栎树猝死病菌检疫鉴定方法犐犱犲狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀狅犳犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪狉犪犿狅狉狌犿犠犲狉狉犲狊,犇犲犆狅犮犽牔犕犪狀犻狀’狋犞犲犾犱20080429发布20081101实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布前言本标准附录A、附录B、附录C和附录D为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院。本标准起草人:吴品珊、严进、廖太林、巫燕。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖/犜2080—2008栎树猝死病菌检疫鉴定方法1范围本标准规定了植物检疫中栎树猝死病菌的检疫鉴定方法。本标准适用于针对栎树猝死病菌寄主的苗木、原木、树皮、枝条、枝叶等植物部分及其土壤和介质,以及木材、木包装和木制品的入境检疫。2原理2.1分类地位英文名:pathogenofsuddenoakdeath,pathogenoframorumleafblight学名:犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪狉犪犿狅狉狌犿Werres,DeCock&Manin’tVeld栎树猝死病菌(犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪狉犪犿狅狉狌犿),也称多枝疫霉,属真菌界(Fungi),卵菌门(Oomycota)卵菌纲(Oomycetes),腐霉目(Pythiales),腐霉科(Pythiaceae),疫霉属(犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪deBary)。犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪狉犪犿狅狉狌犿可侵染多种林木和花卉植物,造成栎树等树木猝死(SuddenOakDeath,简称SOD),以及杜鹃、荚�等花卉枝叶枯萎(TwigBlightofRhododendron)。病菌在世界上的分布和寄主植物参见附录A和附录B。2.2鉴定原理根据栎树猝死病菌在寄主上的为害症状、形态学特性、巢式PCR特异性扩增片段作为鉴定依据。3仪器和用具3.1仪器3.1.1生物显微镜,体视显微镜。3.1.2光照生物培养箱。3.1.3高压灭菌器。3.1.4高速离心机。3.1.5PCR扩增仪,电泳仪,凝胶成像仪。3.2用具3.2.1塑料盒。3.2.2黑光灯(18W,320nm~380nm)。3.2.3塑料研杵,移液器。4试剂和培养基4.1试剂4.1.1琼脂粉,V8液,胡萝卜,杜鹃叶片。4.1.250%匹马霉素,氨苄青霉素钠盐,利福平钠盐,...