SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1395.1-2004禽衣原体间接红细胞凝集试验方法Protocolofindirecthemagglutinationtestforavianchlamydiosis2004-06-01发布2004-12-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布SN/T1395.oli舌本标准的附录A是规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国广东出人境检验检疫局。本标准主要起草人:梁刚、张云桥、陈泽华。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。SN/T1395.1-2004禽衣原体间接红细胞凝集试验方法范围本标准规定了禽衣原体间接红细胞凝集试验方法。本标准适用于禽衣原体病的流行病学调查、诊断和监测。2采样本试验检测样品为禽鸟类动物血清。样品应无菌采集，且不溶血、不腐败。样品4℃时可保存5d,长期存样应一18℃冷藏保存，试验前56℃水浴灭能30min-35min.材料3.1器材恒温水浴箱，96孔V型微量反应板，25tcL,50IL微量移液器，微量振荡器，超净工作台，恒温培养箱，高压消毒器，台式离心机，离心管。3.2稀释液含1%灭能兔血清的pH7.0磷酸缓冲液(PBS)，配制方法见附录A，或按诊断试剂说明书配制。3.3诊断试剂敏化红细胞，标准阳性血清，标准阴性血清。4方法每份被检血清倍比稀释至第6孔，每次检测设一对照试验组，包括敏化红细胞空白对照、阳性及阴性血清对照试验，试验操作程序见表1,表1禽衣原体间接红细胞凝集试验操作程序及结果判定举例成分被检血清稀释度各项对照试验1‘21:41:81:161，321:64空白对照阳性血清对照阴性血清对照稀释液/pL50t50L50U50七50七50飞_50被检血清/t,LsO)一F-50)一=501一1--50J一v50)一~501丫弃去50阳性对照血清/pL50阴性对照血清/pL50敏化红细胞/yL252525252525252525置反应板于微量振荡器上振荡1min.37℃或室温感作结果判定举例+++++十+十+++++++++++++注:所示被检血清红细胞凝集效价为1，32SN/T1395.1-2004被检血清检测程序如下:—每孔滴加稀释液50IL;—将被检血清50pL加人第1孔，依次作倍比稀释至第6孔，最后弃去50pL;—每孔加人敏化红细胞25IL;—置反应板于微量振荡器上振荡1min,混匀;-4lAV板加盖,37℃或室温感作30min-120min，以对照孔出现结果时判读，结果判定5.1凝集程度的判别标准和红细胞凝集效价5.1.1凝集程度的判别标准+++十:红细胞全部凝集，成一均匀的膜，布满整个孔底。+++:红细胞在孔底形成一层薄膜，面积比前者小。++:红细胞在孔底形成薄层凝集，边缘松散或呈锯齿状。+:红细胞在孔底呈小圆...
