中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1449-2004马流行性淋巴管炎检疫方法Quarantinemethodforepizooticlymphangitis2004-06-01发布2004-12-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布SN/T1449-2004前言本标准的附录A和附录B均为规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国山东出入境检验检疫局。本标准主要起草人:卢晓中、王作佳、徐彪。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。SN/T1449-2004马流行性淋巴管炎检疫方法范围本标准规定了马流行性淋巴管炎的病原分离鉴定、酶联免疫吸附试验和皮内变态反应的检疫方法.本标准适用于进出境马流行性淋巴管炎的检疫。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而.鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准.GB/T4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法病原分离鉴定3.1器具棉拭子、平皿、外科剪、镊子、恒温箱、高压灭菌器、铂金耳、酒精灯、显微镜、超净工作台等。3.2培养基及试剂3.2.1动物脏器培养基:制备方法见附录A.3.2.2灭菌生理盐水、革兰氏染液、动物脏器培养基、4%葡萄糖肉汤、糖发酵管、明胶、蛋白陈水、靛基质试剂、硫酸亚铁琼脂、缓冲葡萄糖蛋白陈水、生牛乳等。3.2.3实验用水见GB/T6682.3.3采样采集被检动物软化的未破溃的皮肤结节、化脓灶或病变淋巴结,消毒处理后无菌操作采取脓汁于无菌空试管或无菌平皿内,或直接无菌采取病变组织块于无菌平皿中。脓汁用灭菌生理盐水适当稀释后作为被检材料,干病的痴皮须加适量的10%-30%氢氧化钾(氢氧化钠)液或生理盐水,使其充分溶解后检查。3.4操作方法3.4.1显微镜检查3.4.1.1无染色压片标本镜检3.4.1.1.1用铂耳挑取处理过的病料于洁净的载玻片上,覆盖洁净的盖玻片。3.4.1.1.2在弱光下,先以显微镜(400倍~500倍)检查,然后再用油镜检查。脓汁中的流行性淋巴管炎马伪皮疽组织胞浆菌呈双层膜卵圆形或梨子形,一端或两端尖锐,大小(3pm-4pm)X(2pm^-3pm),菌体内为半液状,并可见到一至数个能活泼运动的小颗粒。3.4.1.2染色标本检查3.4,1.2.1用棉拭子直接沽取被检动物化脓灶周边或病变淋巴结、病变结节组织渗出液涂抹载玻片。3.4.1.2.2自然干燥...