SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1247.1-2003猪繁殖和呼吸综合征间接免疫荧光试验Protocolofindirectimmunofluorescenceassayforporcinereproductiveandrespiratorysyndrome2003-05-28发布2003-12-01实施中华人民共和匡国家质量监督检验检疫总层SN/T1247.1-2003前言本标准根据世界动物卫生组织(OIE)(哺乳动物、禽和蜜蜂A和B类疾病诊断试验和疫苗标准手册》(第四版，200的第三部分X.12的内容编写。本标准的附录A、附录B为规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局。本标准主要起草人:孙延峰、孙颖杰、苏永生、简中友、播凤城。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。SN/T1247.1-2003猪繁殖和呼吸综合征间接免疫荧光试验范围本标准规定了猪繁殖和呼吸综合征的间接免疫荧光试验诊断方法。本标准适用于猪繁殖和呼吸综合征的诊断、流行病学调查、检疫和疫情监测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准.然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法缩略语下列缩略语适用于本标准。3.1IFA间接免疫荧光试验。3.2FITC异硫袱酸荧光黄。3.3PRRS猪繁殖和呼吸综合征。检验检疫4.1原理接免疫荧光试验是将抗原吸附于固相载体上，抗原与抗体反应后，再用荧光素标记的抗抗体与其反应形成抗原一抗体一抗抗体复合物，在荧光显微镜下可见荧光。本标准是以96孔板为载体，将接种猪繁殖和呼吸综合征病毒的细胞固定于96孔板上，依次加人被检血清和用FITC标记的兔抗猪抗体，反应结束后，置荧光显微镜下观察结果。4.2采样采集被检猪血液，分离血清，血清必须新鲜透明不溶血无污染，密装于灭菌小瓶内，4℃或一20℃一30℃冰箱保存或冷藏条件下立即送检。试验前将被检血清统一编号。4.3设备和材料4.3.1仪器设备—微量移液器;—保湿盒;—普通恒温箱及二氧化碳恒温箱;—普通冰箱和低温冰箱;—倒置显微镜;—荧光显微镜;SN/T1247.1-2003—量筒、烧杯等。4.3.2材料和试剂-MARC-145或HS2H细胞由国家质检总局认可的单位提供;-PRRS美洲标准株ATCCVR-2332或欧洲标准株LV标准毒由国家质检总局认可的单位提供;-PRRS病毒标准阳性血清和标准阴性血清由国家质检总...
