SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1382-2004马流产沙门氏菌病凝集试验方法Protocolofagglutinationtestforequinesalmonellosis(equineparatyphoid)2004-06-01发布2004-12-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布SN/T1382-2004pli青本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国山东出人境检验检疫局。本标准主要起草人:卢晓中、焦宏强、于红光、郑雷、马佐喜。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。SN/T1382-2004马流产沙门氏菌病凝集试验方法范围本标准规定了马流产沙门氏菌病凝集反应试验方法。本标准适用于进出境马马流产沙门氏菌病检疫。2原理马在感染了马沙门氏菌病后，血液中的凝集素升高.能使抗原诊断液中的菌体产生凝集，因此可根据被检马血清对抗原的凝集价，判定马是否感染该病。3仪器设备:.:恒温培养箱。试管:12mmX100mm的标准试管。移液管:1mL,2mL的标准刻度移液管。试管架。振荡器。313234试剂4.1抗原由兽医生物药品厂生产供应。本抗原只供马副伤寒性流产(即马流产沙门氏杆菌病)凝集反应诊断用。静置时是白色或灰白色液体，瓶底有少量灰白色沉淀物。振摇后即成均匀的混悬液。使用时作20倍稀释。有效期按照瓶签说明。4.2阳性血清由兽医生物药品厂生产供应。为橙黄色或棕红色透明液体，保存期以内的阳性血清，可供鉴定抗原和诊断时作对照之用。保存期超过一年的阳性血清，经重检凝集价不低于1，1600(++)时，可继续使用半年，供诊断时对照用，但不能用于鉴定抗原。4.3阴性血清由兽医生物药品厂生产供应，为橙黄色或棕红色透明液体，1，200稀释对马流产抗原应无凝集反应保存期为一年半，期满复检如合格，可继续使用一年。4.40.5%石炭酸生理盐水称取0.85g氯化钠(分析纯),0.50g石炭酸(分析纯)，将蒸馏水加至100mL，溶解、过滤，高压灭菌即成。5被检血清对被检马按常规方法静脉采血并分离血清。被检血清必须为新鲜纯净，不溶血或轻微溶血，未腐败变质者6操作方法6.1工作抗原的稀释将抗原的原液充分振摇均匀，根据用量用0.5%石炭酸生理盐水作1:20倍稀释SN/T1382-20046.2被检血清的稀释取标准小试管5支置试管架上，第1,2支管各加人。.5%石炭酸生理盐水1.8mL，第3,4,5管各加人0.5%石炭酸生理盐水1mL。用1mL刻度移液管吸取被检血清0.2mL加人第一管中混合均匀;然后吸取。.2mL加人第二管中，充分混合均匀后，再由第二管吸取1mL加人第三管中;依次类推稀释到第五管，最后将第五管多余的1...
