SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1162-2002传染性胰脏坏死病毒(IPNV)酶链免疫吸附试验(ELISA)诊断方法Testmethodofenzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA)forinfectiouspancreaticnecrosisvirus(IPNV)2002一11一25发布中华人民共和2003一05一01实施国家质量监督检验检疫总局SIN/T1162-2002前言本标准是在参考国际上通用的检测规程和总结我国在这一领域的实践经验的墓础上制定的,作为对1996年发布的GB/T15805.1-1995《淡水鱼类检疫方法第一部分》的一个补充。鉴于目前ELISA快速检测技术已经成熟,具有灵敏、准确、快速的优点,制定此标准有极强的实用性,对已有的国家标准能起到一个补充作用。本标准的附录A是资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国深圳出人境检验检疫局。本标准主要起草人:江育林、刘登,高隆英、史秀杰。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。SN/T1162-2002传染性胰脏坏死病毒(IPNV)酶链免疫吸附试验(ELISA)诊断方法,范围本标准规定了用酶联免疫吸附试验检侧IPN病毒的方法。本标准适用于IPN病毒的分离及病毒抗原的鉴定,及本病的流行病学调查、诊断、检疫和监侧。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单‘不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准.GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法(eqvISO3696:1987)GB18088-2000出人境动物检疫采样3试荆和材料3.1水应符合GB/T6682-1992中二级水的规格。3.2IPN-sp病毒3.3阴性对照正常细胞组织悬液(自备)。3.4IPN-sp病毒标准抗血清3.5酶标羊抗免IgG4器材和设备96孔细胞培养板。酶标板。酶标测定仪。微量移液器等。倒置显微镜。恒温培养箱。普通冰箱和低温冰箱。组织研磨器。离心机和离心管。IPN病毒的分离月,1,JqJ月叼仄J产07了八匕0司,尸:,‘,.-月﹃‘qd.月q月勺月qd.月皿.月﹃‘d51采样对有临床症状的鱼,体长小于等于4cm的鱼苗取整条,体长4cm^6cm的鱼苗取内脏(包括肾);1SN/T1162-2002体长大于6cm的鱼则取肝、肾、脾。对无症状的鱼取肝、肾、脾;成熟雌鱼还需取卵巢液;按GB18088-2000采样。5.2样品处理应在10℃以下进行。先用组织研磨器将样品匀浆。再用培养液(见附录A.1)按1,10的最终稀释度悬浮。在匀浆前未...