SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1151.4-2003对虾黄头病毒(YHv)逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法Protocolofreversetranscriptionpolymerasechainreaction(RT-PCR)foryellowheadvirusofshrimp(YHV)2003-05-28发布2003-12-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布SN/T1151.4-2003.岛召...‘月月q青本标准的附录A是规范性附录,附录s是资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国深圳出人境检验检疫局。本标准主要起草人:刘左、史秀杰、高隆英、江育林。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。SN/T1151.4-2003对虾黄头病毒(YHV)逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法1范围本标准规定了用逆转录聚合酶链式反应技术检测对虾黄头病毒的方法。本标准适用于对虾黄头病毒的鉴定及其流行病学调查、诊断、检疫和监测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法(eqvISO3696:1987)3试荆和材料3.13.23.33.43.53.63.73.83.924244.14.24.34.44.54.64.74.84.9水:应符合GB/T6682-1992中一级水的规格。Taq酶:-20℃保存,不要反复冻融或温度剧烈变化。逆转录酶AMV:-20℃保存,不要反复冻融或温度剧烈变化.核糖核酸酶抑制剂(RNasin):一20℃保存,不要反复冻融或温度剧烈变化。dNTP(含dCTP,dGTP,dATP,dTTP各10mmol/L),引物:浓度为40kmol/L。其序列如下:上游引物10F:5'-CCGCTAATTTCAAAAACTACG-3'下游引物144R:5'-AAGGTGTTATGTCGAGGAAGT-3'异丙醉:分析纯,使用前预冷到一200C,矿物油:要求无DNA酶和RNA酶。标准分子量:推荐使用pUC19DNA/MspI