SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1161-2002衣原体感染检测方法补体结合试验Protocolofcomplementfixation-Testforchlamydiainfection2002一11一25发布2003一05一01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布SN/T1161-2002前言本标准的附录A、附录B,附录C、附录D,附录E均为规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位;中华人民共和国湖北出人境检验检疫局、湖北省农业科学院畜牧兽医研究所。本标准主要起草人:徐涤平、黄晨、刘泽文、陈平、段正赢、颜小平、陈建军、杨宜生,sx/T1161-2002衣原体感染检测方法补体结合试验范围本标准规定的补体结合试验(CF)包括直接补体结合试验(DirectComplementFixationTest,DCF)和间接补体结合试验(IndirectComplementFixationTest,ICF),DCF适用于猪以外的哺乳动物和鹦鹉、鸽(三年龄以上老鸽除外)、火鸡衣原体病的检疫和诊断。ICF适用于其他禽鸟和猪衣原体病的检疫和诊断。2材料准备2.12.2录A,2.3一次。2.42.52.6器材:12tornX37mm.试管、试管架、水浴箱、U型微量反应板(8X12孔)。补体:由官方认可单位供应,按说明书使用和保存。试验前须对补体进行效价滴定。滴定方法见附溶血素:由官方认可单位供应。试验前须对溶血素进行效价滴定,以后每隔2个一3个月测定效价滴定方法见附录Be100绵羊红细胞悬液:制备方法见附录C,敏化红细胞:制备及使用方法见附录A,被检血清:按常规方法采血,分离血清,要求不溶血、无腐败,在血清中加人。01%硫柳汞或。.I%叠氮钠防腐,试验前需灭能。不同动物血清灭能的温度和时间见附录D.了抗原和标准阳性血清、指示血清、阴性血清:由官方认可单位供应,按说明书使用。抗原和阳性血清效价滴定的方法见附录E,3操作方法3.1直接补体结合试验3.1.1试管法按表I的程序操作。试验要同时设抗补体对照、阳性血清对照、阴性血清对照、抗原对照、溶血素对照和生理盐水对照。表飞直接补体结合试验〔试管法)单位为毫升sN/T1161-2002表1(续)单位为毫升成分被检血清各项对照试验管抗补体对照阳性血清阴性血清抗原对照溶血索生理盐水效价I:41:81+161:321:641:128l:42工作量1-42工作量混匀,4`C16h-18h感作,取出后37C水浴30min敏化红细胞0.20.20.20.20.20.20.20.20.20.20.20.2混匀,37C水浴30min结果到足##十+++++##1‘32全不落全不落25落50%落75%溶全溶全溶全不If全溶全溶全溶全不洛3.1.2微量法:用U型8x12孔微量反应板。按表2的程序操作。试验同时设抗补体对照...