ICS65．020．01B16a亘中华人民共和国国家标准GB／T28078--2011水稻白叶枯病菌、水稻细菌性条斑病菌检疫鉴定方法DetectionandidentificationofXanthomonasoryzaepv．oryzae(Ishiyama)Swingseta1．、Xanthomonasoryzaepv．oryzicola(Fangeta1．)Swingseta1．2011—12—30发布2012—06—01实施宰瞀鹊鬻瓣警矬瞥星发布中国国家标准化管理委员会“”。刖昌GB／T28078--2011本标准按照GB／T1．12009给出的规则起草。本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC／TC271)提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国湖南出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国厦门出入境检验检疫局。本标准主要起草人：朱金国、赵文军、唐连飞、朱水芳、莫瑾、彭梓、陈红运、钟文英。1范围水稻白叶枯病菌、水稻细菌性条斑病菌检疫鉴定方法GB／T28078—2011本标准规定了水稻种子和其他水稻材料的水稻白叶枯病菌Xanthomonasoryzaepv．oryzae(Xoo)和水稻细菌性条斑病菌Xanthomonasoryzaepv．oryzicola(Xcola)的检疫鉴定以植物的形态学特征、生理生化特性、分子生物学和酶联免疫学技术作为依据，明确了田问观察、分离鉴定、样品保存的方法。本标准适用于水稻材料和相关环境中水稻自叶枯病菌、水稻细菌性条斑病菌的检测。2规范性§f用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注El期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB15569--1995农业植物词运检疫规程ISTA国际种子检验规程3方法原理根据水稻植株的形态学特征进行田问观察，并采用分离培养、分子生物学和酶联免疫学筛选、生理生化鉴定以及致病性测定对植株材料上的水稻白叶枯病菌、水稻细菌性条斑病菌进行判定。4设备和材料4．1冷冻高速离心机：转速≤15000r／rain。4．2PCR扩增仪。4．3恒温培养箱：28℃±1℃。4．4显微镜：物镜头10×～100×。4．5天平：精度0．001g。4．6高压灭菌器。4．7均质器：转速4000r／min～8000r／rain。4．8可调移液器：0．2pL～1pL，1pL～lopL，10pL～100pL，100pL～1000肛L。4，9器具：灭菌的镊子、剪刀，称量勺。4．10吸管：1mL、10mL。4．11灭菌平皿：直径90mm，玻璃或一次性塑料平皿。4．12三角瓶：i00mL。5培养基和试稠5．1SPA培养基：见A．1。GB／T28078--20115．20．001％吐温20一磷酸盐缓冲液。5．3革兰氏染色试剂：见A．2。5．4鞭毛染色试剂：见A．3。5．5明胶液化培养基：见A．4。5...
