中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌检验MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneExaminationofStaphylococcusaureusGB4789.10一94代替GB4789.10-841主皿内容与适用范圈本标准规定了食品中金黄色葡萄球菌的检验方法。本标准适用于食品和食物中毒样品中金黄色葡萄球菌的检验。2引用标准GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3设备和材料3.1显微镜。3.2温箱:36士10C.3.3离心机。3.4灭菌吸管:1mL,10mL.3.5灭菌试管。36灭菌平皿。3.了均质器。3.8载玻片。3.9L型涂布棒。3.10酒精灯。3.1,接种环。4培养羞和试荆4.14.24.34.44.54.64.7胰酪膝大豆肉汤:按GB4789.28中4.59规定。7.5%抓化钠肉汤:按GB4789.28中4.61规定。血琼脂平板:按GB4789.28中4.6规定。Baird-Parker琼脂平板:按GB4789.28中4.60规定。肉浸液肉汤:按GB4789.28中4.1规定。灭菌盐水。兔血浆:按GB4789.28中4.63规定。中华人民共和国卫生部1994一03一18批准1994一09一01实施GB4789.10一945检验程序金黄色葡萄球菌检验程序如下:6操作步骏6.1增菌培养法6.1.1检样处理称取25g固体样品;吸取25mL液体样品,加人225ml灭菌生理盐水,固体样品研磨或置均质器中制成混悬液。6.1.2增菌及分离培养吸取5mL上述混悬液,接种于7.5%氯化钠肉汤或胰酪陈大豆肉汤50mL培养基内,置36士I'C温箱培养24h,转种血平板和Baird-Parker平板,36士1℃培养24h,挑取金黄色葡萄球菌菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。6.1.3形态本菌为革兰氏阳性球菌,排列是葡萄球状,无芽胞,无英膜,致病性葡萄球菌菌体较小,直径约为0.5-1/AM.6.1.4在肉汤中呈混浊生长,在胰酪脉大豆肉汤内有时液体橙清,菌量多时呈混浊生长,血平板上菌落呈金黄色,也有时为白色,大而突起、回形、不透明、表面光滑,周围有溶血圈。在Baird-Parke:平板上为圆形、光滑凸起、湿润、直径为2-3mm,颜色呈灰色到黑色,边缘为淡色,周围为一混浊带,在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落似有奶油树胶的硬度,偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落,但无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些,外观可能粗糙并6.1.5血浆凝固酶试验GB4789.10一4吸取1-4新鲜兔血浆0.5mL,放人小试管中,再加入培养24h的金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤培养物0.5mL,振荡摇匀,放36士10C温箱或水浴内,每半小时观察一次,观察6h,如呈现凝固,即将试管倾斜或倒置时,呈现凝块者,被认为阳性结果。同...