中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验4789.7一94GB储副溶血性弧菌检验GB4789.7-84MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneExaminationofVibrioparahaemolyticus1主题内容与适用范围本标准规定了副溶血性弧菌的检验方法。本标准适用于食品和食物中毒样品中副溶血性弧菌的检验。2引用标准GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3设备和材料3.1试管:20mmX200mm,15mmX100mm,3.2吸管1mL,5mL,10mL,3.3平皿:皿底直径90mm,3.4广口瓶或三角瓶。3.5电动均质器或乳钵。3.6酒精灯。3.7接种灯和接种环。3.9试管架。3.10载玻片。3.11温箱。3.12显微镜。4培养墓和试荆4.14.24.34.44.54.64.74.84.9氯化钠结晶紫增菌液:按GB4789.28中4.39规定。氯化钠蔗糖琼脂:按GB4789.28中4.40规定。嗜盐菌选择性琼脂:按GB4789.28中4.41规定。3.500氯化钠三糖铁琼脂:按GB4789.28中4.42规定。氯化钠血琼脂:按GB4789.28中4.43规定。嗜盐性试验培养基:按GB4789.28中4.44规定。3.500氯化钠生化试验培养基:按GB4789.28中4.45规定。革兰氏染色液:按GB4789.28中2.2规定。甲基红试剂:按GB4789.28中3.4规定。中华人民共和国卫生部1994一03-18批准1994一09一01实施GB4789.7一944.10靛基质试剂:按GB4789.28中3.13规定。4.11V-P试剂:按GB4789.28中3.4规定。5检验程序副溶血性弧菌检验程序如下:6操作步骤6.1分离培养:首先称取祥品25g，加225mL3.5%灭菌盐水，用均质器打碎或用乳钵磨碎，接种氯化钠琼脂平板和嗜盐菌选择性琼脂平板各I个，同时取10mL，加人100mL增菌液中，放370C8^16h培养后，涂上述平板进行分离，于370C18-24h培养后取出观察。6.2挑取上述可疑菌落，转种3.50/n氯化钠三糖铁斜面，37`C.24h观察结果。6.3涂片镜检:将三搪铁培养基反应可疑者(底层变黄葡萄糖产酸不产气，斜面不变乳塘蔗糖不分解，有动力，不产生硫化氢)进行涂片革兰氏染色镜检形态。6.4嗜盐性试验:将上述可疑培养物分别接种于不同浓度的盐膝水中，370C24h培养后观察生长情况，在无盐和10肠以上盐的陈水中不生长，在7%盐的陈水中生长良好者进行下列有关试验。6.5生化试验:分别接种各类生化培养基，放37C,除V-P,靛基质、甲基红试验培养48h后加试剂观察外，其他均可在24h观察。GB4789.7一94表1副溶血性弧菌的生化学性状V-P靛基质赖氨酸鸟氮酸精氨酸溶血++十+/一+/牛一+酸气糖塘醉氢红产产糖糖露化基萄萄葡葡蔗乳甘硫甲注:+阳性;一阴性;+/一多数阳性，少数阴性表2副溶血性弧菌主要性状与其他弧菌的鉴...
