中华人民共和国国家标准谷物和谷物产品a-淀粉酶活性的测定比色法GB5521一89Methodfordeterminationofalpha-amylase代替GB5521-85activityincerealandcerealproducts-Colorimetricmethod本标准等效采用国际标准ISO3983-1977《谷物和谷物产品a-淀粉酶活性的测定比色法》。1主题内容和适用范围本标准规定了用比色法测定谷物和谷物产品a一淀粉酶活性所用仪器、试剂、分析步骤和结果计算。本标准适用于测定谷物和谷物产品a一淀粉酶活性，也可用于测定源于真菌或细菌的a-淀粉酶干粉的活性。2定义1L溶剂从1g样品中所提取的酶，在规定条件下，每秒钟降解1.024x10-5单位的刀一极限糊精底物溶液，则该样品的a一淀粉酶活性等于一个单位，极限糊精是被fi-淀粉酶完全降解了的淀粉产物。3原理酶降解刀一极限糊精底物溶液，应时间的增加而使颜色强度降低，经过不同的反应时间，将反应混合物等分加到碘溶液中。随着反以测定酶活性。4试剂4.1碘(GB678-77)14.2碘化钾(GB1272-77)14.3冰乙酸(GB676-78);4.4硫酸(GB625-78),4.5无水乙酸钠(GB694-81)t4.6抓化钙;4.了可溶性淀粉‘、注:1)可采用Liatner淀粉或质里相当的国产可溶性淀粉。浙江菱湖化工试剂厂产品符合要求。4.8浮石粉，4.，碘贮备液:称取11.0g碘化钾溶于少量水中，加入5.509结晶碘，搅拌至碘完全溶解。再定容至250mL，置于棕色瓶中，在暗处贮存，此溶液可保存一个月;4.10碘稀释液:称取40.09碘化钾溶于水中，加4.00mL碘贮备液，并稀释至1L，用时现配，不可过夜，中华人民共和国商业部1988一12-31批准1989一09;一01实施CB5521一.84.114.124.134.14缓冲液:称取164g无水乙酸钠溶于水中，加人120mL冰乙酸用水定容至1L,0.2%(m/犷)氛化钙溶液，0.05mol/L硫酸溶液;fl-淀粉酶溶液:称取log有酶活性的黄豆粉(粗细度为通过1.5mm孔筛)，加人85rnL水和15mLO.05mol/L硫酸充分搅匀，静置15min，抽滤，该滤液用于制备冬极限糊精底物溶液;4.15,B一极限糊精底物溶液:称取5.00g(于基)可溶性淀粉于小烧杯中，加人约20mL水混匀，将其边搅拌边缓慢倒人盛有100mL沸水的500mL高型烧杯中，并用洗瓶将小烧杯中的淀粉全部转移至高型烧杯中，继续搅拌并加热，缓慢煮沸2min。加盖表面皿，在自来水中冷却至30℃以下，加入25mL缓冲溶液及50mL刀-淀粉酶液，在室温下放置20h，加人1勺浮石粉，将此溶液在1Omin之内缓慢煮沸，然后继续沸腾5min以上。冷却至300C以下，用水定容至250mL,摇匀，过滤。滤液中加几滴甲苯，此溶液的pH值应为4.7t0.1，在25℃...
