中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂4789.28-94GB4789.2884曲储MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneStainningmethods,culturemediumsandreagents1主题内容与适用范围本标准规定了各种染色法、培养基和试剂。本标准适用于食品和食物中毒样品中各类微生物的检验。2染色液配制及染色法2.1美蓝染色法2.，.，吕氏碱性美蓝染色液美蓝0.3g95%乙醇30mL。01%氢氧化钾溶液100mL将美蓝溶解于乙醉中，然后与氢氧化钾溶液混合。2.，.2染色法将涂片在火焰上固定，待冷。滴加染液，染1-3min，水洗，待干，镜检。2.1.3结果菌体呈蓝色。2.2革兰氏染色法2.2.1结晶紫染色液结晶紫1995%乙醇20mL100草酸钱水溶液80mL将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸馁溶液混合。2.2.2革兰氏碘液碘19碘化钾29蒸馏水300mL将碘与碘化钾先进行混合，加人蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300mLo2.2.3沙黄复染液沙黄0.25995%乙醇10mL蒸馏水一90mL中华人民共和国卫生部1994一03-18批准1994一09一01实施Gs4789.28一94将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。2.2.4染色法2.2.4.1将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染1min，水洗。2.2-4.2滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗。2.2.4.3滴加95乙醇脱色，约30s;或将乙醇滴满整个涂片，立即倾去，再用乙醇滴满整个涂片，脱色10so2.2-4.4水洗，滴加复染液，复染1min。水洗，待干，镜检。2.2.5结果革兰氏阳性菌呈紫色。革兰氏阴性菌呈红色。注亦可用1:10稀释石炭酸复红染色液作复染液，复染时间仅需10。。2.3耐酸性染色法(垂一倪二氏法)2.3.1石炭酸品红染色液碱性品红0.3g95%乙醇10mL5%酚水溶液90mL将品红溶解于乙醇中，然后与酚溶液混合。2.3.23%盐酸一乙醇浓盐酸3mL95%乙醇97mL2.3.3复染液吕氏碱性美蓝染色液。2.3.4染色法2.3.4.1将涂片在火焰上加热固定，滴加石炭酸品红染色液，徐徐加热至有蒸气出现，但切不可使沸腾。染液如因蒸发减少时，应随时添加。染5min，倾去染液，水洗。2.3-4.2滴加盐酸一乙醇脱色，直至无红色脱落为止(所需时间视涂片厚薄而定，一般为1^-3min)，水洗。2.3-4.3滴加吕氏碱性美蓝染色液，复染30.1min，水洗，待干，镜检。2.3.5结果:耐酸性细菌呈红色，其他细菌、细胞等物质呈蓝色。2.4柯氏染色法2.4.1染色液2.4，，10.5%沙黄液。2.4.1.20.5%孔雀绿液。2.4.2染色法2.4.2.1将涂片在火焰上固定，滴加。.5%沙黄液，并加热至出现气泡，约2^-3min，水洗。2.4-2.2滴加。.5%孔雀绿...
