中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验GB4789.11一94溶血性链球菌检验代替GB4789.11-84MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneExaminationofStreptococcushemolyticus1主皿内容与适用范围本标准规定了食品中溶血性链球菌的检验方法.本标准适用于食品和食物中毒样品中溶血性链球菌的检验。2引用标准GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3设备和材科3.1温箱:36士1"C,3.2水浴:36士1'C。3.3显徽镜.3.4离心机。3.5试管架。3.6灭菌平皿。3.了灭菌小试管。3.8载玻片。3.9灭菌吸管:1mL,10mL,3.10灭菌镊子。3.11均质器。3.12酒精灯。3.13接种环。4培养基和试荆葡萄搪肉漫液肉汤:按GB4789.28中4.1规定,在肉浸液肉汤内加入1%葡萄糖。肉浸液肉汤:按GB4789.28中4.1规定。匹克氏肉汤:按GB4789.28中4.62规定。血琼脂平板:按GB4789.28中4.6规定。人血浆。0.25%抓化钙。灭菌生理盐水。月..六乙口︺月﹃只︺心U7,4.4.4.4.4.4.东中华人民共和国卫生部1994一03一18批准1994一09一01实施GB4789.11一944.8杆菌肤药敏纸片(含0.04单位)。检验程序检样26g(mL)+226.L灭菌生理盆水荀萄格肉搜液肉汤或匹克氏肉汤36士1'C血平板36士1CI24h血平板(分纯培养)36士ICI24h涟段醉试验杆菌肤敏撼试验观察落血革兰氏染色报告6操作步骇6.1样品处理称取25g固体检样;称取25mL液体检样,加入225mL灭菌生理盐水,研成匀浆制成混悬液。6.2一般培养.将上述混悬液吸取5mL,接种于50mL葡萄糖肉浸液肉汤;或直接划线接种于血平板,如检样污染严重,可同时按上述量接种匹克氏肉汤,经36士1℃培养24h,接种血平板.置36士1℃培养24h,挑起乙型溶血图形突起的细小菌落,在血平板上分纯,然后观察溶血情况及革兰氏染色,并进行链激酶试验63形态与染色本菌呈球形或卵圆形,直径0.5^-1dam,链状排列,链长短不一,短者个,链的长短常与细菌的种类及生长环境有关;液体培养中易呈长链芽抱,无鞭毛,不能运动。4^-8个细胞组成,长者20^-30;在固体培养基中常呈短链,不形成6.4培养特性该菌营养要求较高,在普通培养基上生长不良在血清肉汤中生长时管底呈絮状或顺粒状沉淀。,在加有血液、血清培养基中生长较好。溶血性链球菌乳光,直径约。.5-透明的溶血圈。血平板上菌落为灰白色,半透明或不透明,表面光滑,有0.75mm,为圆形突起的细小菌落,乙型溶血链球菌周围有2-4mm界限分明、无色65链激酶试验致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶(即溶纤维蛋白酶),白酶原,使成血浆蛋白酶,而后溶...