中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验常见产毒霉菌的鉴定478'9.16-94GB4789.16-84GB储MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneIdentificationofcommonmycotoxinproducingfungi1主题内容与适用范围本标准规定了食品中常见的产毒霉菌的鉴定方法。本标准适用于曲霉属、青霉属、镰刀菌属及其他菌属的产毒菌种的鉴定。2弓1用标准GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3设备和材料3.1显微镜。3.2目镜测微计。3.3物镜测微计。3.4温箱。35冰箱。3.6无菌接种罩。3.了放大镜。3.8酒精灯。3.9接种钩针。3.10分离针。3.11滴瓶。3.12载物玻片。3.13盖玻片:18MMX18mm,3.14小刀。4培养基和试荆;:乳酸一苯酚液:按GB4789.28中3.24规定。察氏培养基:按GB4789.28中4.77规定。马铃薯一葡萄糖琼脂培养基:按GB4789.28中4.79规定。马铃薯琼脂培养基:按GB4789.28中4.80规定。玉米粉琼脂培养基:按GB4789.28中4.82规定。4.14.243中华人民共和国卫生部1994一03一18批准1994一09一01实施Gs4789.16-945操作步骤5.1菌落的观察:为了培养完整的巨大菌落以供观察记录,可将纯培养物点植于平板上。方法是:将平板倒转,向上接种一点或三点,每菌接种两个平板,倒置于25^280C温箱中进行培养。当刚长出小菌落时,取出一个平皿,以无菌操作,用小刀将菌落连同培养基切下1cmX2cm的小块,置菌落一侧,继续培养,于5-14d进行观察。此法代替小培养法,可直接观察子实体着生状态。5.2斜面观察:将霉菌纯培养物划线接种(曲霉、青霉)或点种(链刀菌或其他菌)于斜面,培养5-14d,观察菌落形态,同时还可以将菌种管置显微镜下用低倍镜直接观察抱子的形态和排列。5,3制片:取载玻片加乳酸一苯酚液一滴,用接种针钩取一小块霉菌培养物,置乳酸一苯酚液中,用两支分离针将培养物撕开成小块,切忌涂抹,以免破坏霉菌结构。然后加盖玻片,如有气泡,可在酒精灯上加热排除。制片时最好是在接种罩内操作,以防抱子飞扬。5.4镜检:观察霉菌的菌丝和抱子的形态和特征、抱子的排列等,并做详细记录。55报告:根据菌落形态及镜检结果,参照以下各种霉菌的形态描述及检索表,确定菌种名称。6各种姆菌的形态特征6.1曲霉属(Aspergillus)本属的产毒霉菌主要包括黄曲霉、寄生曲霉、杂色曲霉、构巢曲霉和棕曲霉。这些霉菌的代谢产物为黄曲霉毒素、杂色曲霉素和棕曲霉毒素。曲霉属的颜色多样,而且比较稳定。营养菌丝体由具横隔的分枝菌丝构成,无色或有明亮的颜色,一部分埋伏型,一部分气生型。分生...