ICS11.220B41中华人民共和国农业行业标准NY/T561-2002动物炭疽诊断技术Diagnostictechniquesforanimalanthrax2002一08一27发布2002一12一01实施中华人民共和国农业部发布NY/T561-2002前言炭疽是由炭疽杆菌所致的人畜共患烈性传染病,对反当动物危害尤为严重。本病分布于世界各地,目前很多国家和地区仍有本病的发生,我国个别地区也有散发。世界动物卫生组织〔WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OfficeIntentionaldesEpizootic(法),OIE]将该病列为B类动物传染病,我国农业部将其规定为二类动物传染病。本标准与OIE编著《哺乳动物、禽和蜜蜂A和B类疾病诊断试验和疫苗标准手册》(2000)中有关炭疽抗原的诊断技术基本一致。但该手册介绍的血清学试验,由于特异性和敏感性较差而未采用。本标准吸收了农业部1979年颁布的《皮张炭疽沉淀反应技术操作规程》和《荧光抗体检验撰、毛、绒类炭疽杆菌操作规程》等部分内容,因此,在本标准实施之后,上述规程将自动废止。本标准的附录A,附录B为规范性附录。本标准由农业部畜牧兽医局提出。本标准由全国动物检疫标准化委员会归口。本标准起草单位:中国人民解放军军需大学。本标准主要起草人:王世若、王兴龙、沈广、韩文瑜、梁焕春。NY/T561-2002动物炭疽诊断技术1范围本标准规定了动物炭疽杆菌分离培养鉴定及血清学试验方法。本标准适用于各种动物炭疽病的诊断及检疫。2新鲜疑似炭疽病料标本的细菌学检查2.1显微镜检查2.1.1材料准备2.1.1.1器材恒温箱、显微镜、高压灭菌器、煮沸消毒器、漏斗、15mmX150mm试管、最小反应管、移液管、带胶乳头的毛细吸管(或血清加样器)、乳钵、中性石棉、5ml一注射器、外科刀、镊、铂金耳、酒精灯等。2.1.1.2培养基戊烷眯多粘菌素血液琼脂平板、碳酸氢钠琼脂平板、快速增殖肉汤、普通营养肉汤、普通营养琼脂平板、2%绵羊血液琼脂平板、2%兔血清琼脂平板等,配制方法见附录Ao2.1.1.3试剂炭疽沉淀素血清、阴性血清、标准炭疽杆菌抗原、炭疽荧光抗体、炭疽噬菌体。2.1.1.4溶液及染色液克氏固定液、磷酸盐缓冲盐水(PBS),缓冲甘油、0.5%苯酚(俗名石炭酸)溶液、福尔马林龙胆紫染色液、碱性美蓝染色液、革兰氏染色液,配方见附录Be2.1.1.5实验动物体重17g-20g清洁级昆明系小鼠。2.1.2病料标本采集疑为炭疽动物,除慢性者外,其他不论是最急性者或急性者均于生前将耳部消毒后取血液,病变部取水肿液或渗出液等直接涂于载玻片上,自然干燥后,将玻片涂面相对叠好,中间用火柴杆隔开,以...