ICS65.020.20B05DB45广西壮族自治区地方标准DB45/T2171—2020甘蔗品种真实性鉴定SSR分子标记法SSR-basedmethodsforvarietygenuinenesstestingofsugarcane2020-10-29发布2020-11-30实施广西壮族自治区市场监督管理局发布DB45/T2171—2020I前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由广西壮族自治区分析测试研究中心提出并宣贯。本文件由广西糖业标准化技术委员会归口。本文件起草单位：广西益谱检测技术有限公司、广西博测检测技术服务有限公司、广西吉锐安全技术有限公司、广西壮族自治区分析测试研究中心。本文件主要起草人：梁俊、刘守廷、黄易勤、苏丽梅、杜寒春、黄小娟、刘巧频、何慧、梁群清、莫璋红、韦秋翠、韦秀兰。DB45/T2171—20201甘蔗品种真实性鉴定SSR分子标记法1范围本文件规定了利用简单重复序列（SSR）标记进行甘蔗品种真实性鉴定的操作程序、数据记录与统计、判定方法。本文件适用于甘蔗品种SSR指纹数据采集及品种真实性鉴定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB19489实验室生物安全通用要求3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1推荐引物recommendedprimer品种鉴定中优先选用一套简单重复序列（SSR）引物，其检测位点具有多态性高、重复性好等综合特性。3.2对照品种controlvariety对照品种具有所用SSR位点上不同等位变异的特性。对照品种用于辅助确定待测样品的等位变异，校正仪器设备的系统误差。4缩略语下列缩略语适用于本文件。SSR：简单重复序列（Simplesequencerepeats）；PCR：聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction）；DNA：脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleicacid）。5原理依据甘蔗品种基因组中SSR的重复次数存在差异，通过PCR扩增及电泳技术可以鉴定甘蔗品种。DB45/T2171—202026材料和试剂除另有说明外，本文件中使用分析纯（含）以上试剂，用水符合GB/T6682规定的二级水，其中PCR用水要求达到一级水指标。6.1试剂6.1.1三羟甲基氨基甲烷（C4H11NO3）：纯度＞99%。6.1.2乙二胺四乙酸二钠(EDTA·2Na)：纯度≥99.0%。6.1.3硼酸（H3BO3）：ρ=1.43g/cm³，含量≥99.5%。6.1.4十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）：ρ=1.32g/mL，纯度≥99.0...
