中华人民共和国国家标准GB1519314一94致畸试验Teratogenicitytest1主肠内容与适用范围本标准规定了预测环境有害物质对人体产生胚胎毒性及致晴性实验方法。本标准适用于在我国生产和销售的一切食品原料及食品用产品的致畸性评价。如新资源食品、食品添加剂、食品用包装材料及洗涤消毒剂等，2原理母体在孕期受到可通过胎盘屏障的某种有害物质作用，影响胚胎的器官分化与发育，导致结构和机能的缺陷，出现胎儿畸形。因此，在受孕动物的胚胎着床后，并已开始进人细胞及器官分化期时投与受试物，可检出该物质对胎儿的致琦作用。3试剂及其配制实验用水为蒸馏水3.，甲醛、冰乙酸,2,4,6一三硝基酚、氢氧化钾、甘油、水合氛醛、茜素红.3.2茜素红贮备液:茜素红-S,50%乙酸饱和液5.0mL，甘油10.0mL,l%水合氯醛溶液60.0mL混合，放入棕色瓶中.3.3茜素红应用液:取贮备液3-5mL，用1-2g/100mL氢氧化钾液稀释至1000mL,存于棕色瓶中。3.4透明液A:甘油200mL,9氧化钾10g,燕馏水790mL棍合。3.5透明液B:甘油与蒸馏水等量混合。3.6固定液:Bouins液:2,4,6一三硝基酚75份、甲醛2。份、冰乙酸5份。4仪器与设备41实验室常用设备。4.2生物显微镜及体视显微镜。4.3游标卡尺(百分尺)。5实验动物常用试验动物为大鼠、小鼠和家兔。传统致畸应选健康性成熟(90100d)雌、雄大鼠，雌性应为未交配过的大鼠80-90只，雄鼠减半。6剂t分组至少设四个组，一个空白对照,3个试验组。剂量原则上可采用1/4,1/16,1/64LD5o，或以亚急性毒中华人民共和国卫生部1994一08一10批准1994一08一10实施GB15193.14一94性试验的最大无作用剂量为高剂量组，其1/3。左右为低剂量组，在其间设一组。对某种新的动物，初次试验可设一阳性对照组。每组至少12只孕鼠常用阳性对照物有敌枯双(0.5^1.0mg/kg体重)、五氯酚钠(30mg/kg体重)、阿斯匹林(250^-300mg/kg体重)及维生素A25000^-40000IU等。了操作步骤7.1“受孕动物”的检查和给受试物时间性成熟雌、雄大鼠按1:1(或2:1)同笼后，每日早晨观察阴栓(或阴道涂片)，查出阴栓(或精子)，认为该鼠已交配，当日作为“受孕”零天。如果5d内未交配，应更换雄鼠。检出的“孕鼠”随机分到各组，并称重和编号，在受孕的第7^16d，每天经口给予受试物(按。.5-1.0mL/100g体重计)。受孕的。、7,12,16,20d称体重，并计算给受试物的量。动物交配期室温在20^25℃为宜，环境安静，必要时给予增加麦芽和蛋糕等营养物质。了.2孕鼠处死和检查大鼠于妊娠第20d，小鼠第18d，兔第29d处死。大鼠用2...
