中华人民共和国国家标准饲料中霉菌检验方法GB13092一91MethodfordeterminationofMoldsinfeeds,主肠内容与适用范围本标准规定了饲料中霉菌的检验方法。本标准适用于饲料中霉菌的检验。2原理根据霉菌生理特性,选择适宜于霉菌生长而不适宜于细菌生长的培养基,采用平皿计数方法,测定霉菌数。3设备及材料3.1天平:感量1g,最大秤量1000g,3.2显微镜:150OX。3.3温箱:25一28士1'C。3.4冰箱:普通冰箱。3.5高压灭菌器:2.5kg.3.6干燥箱:50^-250士I'Ca17水浴锅:45-77士10C。I8振荡器:往复式。3.9微型混合器:2900r/min,3.10电炉。3.11酒精灯。112接种棒:镍铬丝。3.13温度计:100士I'C。114载玻片。115盖玻片。3.16乳钵。117试管架。118玻璃三角瓶:250,500mI。119试管:15X150mmo3.20平皿:直径9Cm,3.21吸管:1,10mL,3.22玻珠:直径5mm.国家技术监督局1991一07一16批准1992一04一01实施GB13092一913.23广口瓶:100,500ML,3.24金属勺、刀等。3.25橡皮乳头。4培养基和稀释液高盐察氏培养基。稀释液。试验室常用消毒药品。4142435检验程序霉菌检验程序如下:6操作步骤6.1采样采样时必须特别注意样品的代表性和避免采样时的污染。首先准备好灭菌容器和采样工具,如灭菌牛皮纸袋或广口瓶,金属勺和刀,在卫生学调查基础上,采取有代表性的样品,样品采集后应尽快检验,GB13092一91否则应将样品放在低温干燥处。根据饲料仓库、饲料垛的大小和类型,分层定点采样,一般可分三层五点或分层随机采样,不同点的样品,合。充分混合后,取500g左右送检,小量存贮的饲料可使用金属小勺采取上、中、下各部位的样品混海运进口饲料采样:每一船仓采取表层、上层、中层及下层四个样品,每层从五点取样混合,如船仓盛饲料超过10000t,则应加采一个样品。必要时采取有疑问的样品送检。6.2以无菌操作称取样品25g(或25mL),放入含有225mL灭菌稀释液的玻塞三角瓶中,置振荡器上,振摇30min,即为1:10的稀释液。6.3用灭菌吸管吸取1:10稀释液10mL,注入带玻璃珠的试管中,置微型混合器上混合3min,或注入试管中,另用带橡皮乳头的1mL灭菌吸管反复吹吸50次,使霉菌抱子分散开。6.4取1mL1:10稀释液,注入含有9mL灭菌稀释液试管中,另换一支吸管吹吸5次,此液为1:100稀释液。6.5按上述操作顺序作1。倍递增稀释液,每稀释一次,换用一支1mL灭菌吸管,根据对样品污染情况的估计,选择三个合适稀释度,分别在作10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度作两个平皿,然后将凉至45℃左右的...