中华人民共和国专业标准全氮和粗蛋白测定法DeterminationoftotalnitrogenandZBX66026-87crudeprotein━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━本方法适用于酿造酱油的原料、半成品、副产品的全氮、粗蛋白测定。1仪器a.分析天平:感量0.1mg;b.凯氏烧瓶;c.铁架、铁圈、石棉网;d.煤气灯(或电炉);e.干燥管、抽气管、橡皮管;f.氮气球、冷凝管、锥形瓶;g.粉碎机等。2试剂与溶液2.1甲基红-溴甲酚绿混合指示剂甲基红40mg,溴甲酚绿1g,溶于60mL95%乙醇中。2.2硫酸铜-硫酸钾混合试剂硫酸铜:硫酸钾=6∶100(硫酸铜和硫酸钾都为分析纯)。2.3玻璃珠(φ3mm)或锌粒。2.44%硼酸溶液称取化学纯硼酸4g,用蒸馏水溶解后定容至100mL。2.5浓硫酸(分析纯)2.640%氢氧化钠溶液称取化学纯氢氧化钠40g,加蒸馏水溶解,定容至100mL。2.70.1N盐酸标准溶液量取分析纯盐酸9mL,加蒸馏水稀释至1000mL。2.7.1用无水碳酸钠标定:准确称取无水碳酸钠(预先在180℃的烘箱中烘至恒重)3份,每份重约0.17g,称准至0.0002g。分别置于150mL锥形瓶中,各加已煮沸过蒸馏水30mL,温热摇动,使之溶解。再各加甲基红-溴甲酚绿混合指示剂2滴,然后用待标定的盐酸溶液滴定,直至溶液刚呈暗红色为终点,记下耗用毫升数(V)。计算:盐酸标准溶液的当量浓度N按下式计算GN=━━━━━━……………………………………(3)V×0.05299式中:N——盐酸标准溶液的当量浓度;G——无水碳酸钠之重量,g;V——盐酸溶液之用量,mL;0.05299——每毫克当量Na2CO3之重量,g。2.7.2用已知当量浓度的氢氧化钠标定:准确吸取25mL需要标定的盐酸溶液于150mL锥形瓶中,加酚酞指示剂2滴,用0.1N氢氧化钠标准溶液滴至微红色,在30s内不退色为终点。记下耗用mL数。计算:NNaOH×VNaOH盐酸当量=━━━━━━━━…………………………………(2)25式中:NNaOH——已知浓度的氢氧化钠溶液的当量浓度;VNaOH——氢氧化钠溶液的滴定量,mL;25——待标定盐酸吸取量,mL。2.7.3标定程序:若要使盐酸标准溶液的当量浓度尽可能接近0.1000N,可根据初标定浓度加水或盐酸,多次标定后最终达到。为操作简便,可使用2.7.2法,最后用2.7.1法标定。3操作方法3.1消化准确吸取原样2mL(或称取固体样品0.5g,称准至0.0002g)。置于干燥的500mL凯氏烧瓶中,加入硫酸铜—硫酸钾混合试剂5g,浓硫酸8mL,然后放入通风橱内(烧瓶口上放置小漏斗),加热消化至烧瓶内碳化颗粒完全消失,消化液呈浅绿色后,再继续加热10min左右,一般消化时间不超过30min。也可于瓶...
