附件3小麦粉中曲酸的测定BJS2020031范围本标准规定了小麦粉中曲酸的高效液相色谱测定方法。本标准适用于小麦粉中曲酸的测定。2原理用纯水提取试样中曲酸，采用配有二极管阵列检测器或紫外检测器的高效液相色谱仪检测，外标法定量。3试剂和材料除另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂3.1.1甲醇（CH3OH）：色谱纯。3.1.2磷酸二氢钾（KH2PO4）。3.1.3磷酸（H3PO4）。3.2试剂配制磷酸二氢钾溶液（0.02mol/L，pH3.7）：称取2.722g磷酸二氢钾（3.1.2），加水溶解并定容至1000mL，加入磷酸（3.1.3）调节pH在3.7±0.1之间，经水相微孔滤膜（0.45μm）过滤后备用。13.3标准品曲酸标准品英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量、结构式见附录A，纯度≥99%。3.4标准溶液配制3.4.1标准储备液（1000mg/L）：准确称取曲酸标准品100mg（精确至0.0001g），加水溶解并转移至100mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀，制成浓度为1000mg/L标准储备液，4℃避光保存，有效期3个月。3.4.2标准使用液（10.0mg/L）：准确吸取标准储备液（3.4.1）1.0mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，制成浓度为10.0mg/L的标准使用液，4℃避光保存，有效期3个月。3.4.3标准系列工作溶液：准确吸取标准使用液（3.4.2）适量，用水配制成质量浓度为0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、5.0mg/L，或依仪器响应和实际情况配制适当浓度的标准系列工作溶液。4仪器与设备4.1液相色谱仪：配有二极管阵列检测器或紫外检测器。4.2分析天平：感量分别为0.01g和0.0001g。4.3pH计：精度0.01。4.4超声波水浴。4.5离心机：转速≥8000r/min。5分析步骤5.1试样提取称取1g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入20mL水，超声提取20min，8000r/min离心10min。上清液转移至25mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，过水相微2孔滤膜（0.45μm），取续滤液，待测。5.2仪器参考条件5.2.1色谱柱：C18柱，4.6mm×250mm，5μm，或同等性能的色谱柱。5.2.2流动相：甲醇∶磷酸二氢钾溶液（0.02mol/L，pH3.7）=8:925.2.3流速：1.0mL/min5.2.4检测波长：273nm5.2.5柱温：30°C5.2.6进样量：10μL5.3标准曲线的制作将曲酸标准系列工作液注入高效液相色谱仪中，测定组分的峰面积。以相应标准工作液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。5.4试样溶液的测定将试样溶液注入高效液相色谱仪中，得到相应的峰面积。试样中目标化合物色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比...
