ICS65.020.30B44中国实验动物学会团体标准T/CALAS88—2020实验动物伪欣氏鲍特菌检测方法Laboratoryanimal-MethodfordetectionofBordetellapseudohinzii2020-12-01发布2021-01-01实施中国实验动物学会发布全国团体标准信息平台前言本文件按照GB/T1.1—2020给出的规则起草。本文件由中国实验动物学会归口。本文件由全国实验动物标准化技术委员会（SAC/TC281）技术审查。本文件由中国实验动物学会实验动物标准化专业委员会提出并组织起草。本文件起草单位：广东省实验动物监测所。本文件主要起草人：黄树武、陈梅玲、罗银珠、何丽芳、闵凡贵、王静、张钰。全国团体标准信息平台实验动物伪欣氏鲍特菌检测方法1范围本文件规定了实验动物伪欣氏鲍特菌（Bordetellapseudohinzii）病原分离培养鉴定。本文件适用于啮齿类实验动物中伪欣氏鲍特菌的检测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。凡是注明日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T14926.42《实验动物细菌学检测标本采集》GB/T14926.43《实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂》GB19489《实验室生物安全通用要求》3基本原理伪欣氏鲍特菌为革兰氏阴性杆菌，在血琼脂平皿上培养可形成特殊的菌落形态，有独特的生化反应，据此可进行该菌的分离培养和检测。4主要设备和材料a）恒温生化培养箱。b）生物显微镜。5培养基和试剂a）血琼脂平皿。b）DHL琼脂平皿。c）氧化酶试剂或试纸条。d）过氧化氢酶。e）革兰氏染色液。f）生化试验试剂：葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、果糖、乳糖、甘露糖、鼠李糖、棉子糖、松二糖、松三糖、海藻糖、纤维二糖、阿拉伯糖、肌醇、甘露醇、山梨醇、卫矛醇、阿拉伯醇、侧金盏花醇、三糖铁、半固体、丙二酸盐、西蒙氏柠檬酸盐、硝酸盐、尿素酶、明胶、鸟氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶。全国团体标准信息平台105实验动物伪欣氏鲍特菌检测方法6检测程序7操作步骤7.1生物安全措施实验操作及处理按照GB19489的规定，由具备相关资质的工作人员进行相应操作。7.2采样无菌操作采取动物的呼吸道分泌物。7.3分离培养将样本接种血琼脂平皿和DHL琼脂平皿，置（36±1）℃恒温生化培养箱培养24h～48h。7.4鉴定挑选血琼脂平皿或DHL琼脂平皿上可疑菌落，染色镜检，镜检符合菌体特征的接种血琼脂平皿纯培养，置（36±1）℃培养24h。从血琼脂平皿上挑取新鲜菌落做生化反应试...
