ICS11.220B42DB13河北省地方标准DB13/T2894—2018动物尿液中苯乙醇胺A的测定酶联免疫吸附法2018-12-13发布2018-12-31实施河北省市场监督管理局发布DB13/T2894—2018I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由河北省农业厅提出。本标准起草单位：河北省科学院生物研究所、河北省兽药监察所、石家庄市畜产品质量监测中心。本标准主要起草人：李春生、米振杰、李云、刘静静、赵义良、杜顺丰、吴萌、王振来、张静。DB13/T2894—20181动物尿液中苯乙醇胺A的测定酶联免疫吸附法1范围本标准规定了动物尿液中苯乙醇胺A的测定酶联免疫吸附法的原理、试剂和材料、仪器和设备、样品处理、测定、结果计算、检出限、准确度、精密度、确证试验等要求。本标准适用于动物尿液中苯乙醇胺A的快速筛查。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规则和试验方法GB/T33411酶联免疫分析试剂盒通则NY/T3146动物尿液中22种β-受体激动剂的测定液相色谱-串联质谱法3原理采用酶联免疫吸附法，在微孔条上包被偶联抗原，样本中的苯乙醇胺A与酶标板上的偶联抗原竞争苯乙醇胺A抗体，加酶标记的抗体后，显色剂显色，终止液终止反应。用酶标仪在450nm处测定吸光度，吸光度值与苯乙醇胺A含量成负相关，与标准曲线比较即可得出苯乙醇胺A含量。4试剂和材料以下所有的试剂，除特别注明外均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的二级水。4.1苯乙醇胺A酶联免疫吸附法试剂盒：应符合GB/T33411的规定，组成见附录A。4.2乙酸铵。4.3乙酸。4.4氢氧化钠。4.5乙酸乙酯。4.6氯化钠。4.7β-盐酸葡萄糖醛苷酶。4.8芳基硫酸酯酶。4.9苯乙醇胺A标准品。DB13/T2894—201824.10乙酸铵缓冲液(2mol/L)：称取乙酸铵15.4g，溶解于1000mL水中，用适量乙酸调pH至5.2。4.11氢氧化钠溶液(5mol/L)：称取氢氧化钠2g，溶解于10mL水中。4.12β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶：β-盐酸葡萄糖醛苷酶活性约30U/mL；芳基硫酸酯酶活性约60U/mL。5仪器和设备5.1分析天平：感量0.1g。5.2酶标仪：配备450nm滤光片。5.3离心机：10000rpm。5.4旋涡混合器。5.5恒温箱。5.6电热恒温振荡水槽。5.7氮吹仪。5.8pH计。5.9微量移液器：50μL，100μL，200μL，1000μL。5.10八道移液器：250μL。6样品处理6.1样品制备动物尿液试样使用前放置室温，如有混浊，离...
