ICSs4111.220中华人民共和国农业行业标准NY/T575-2002牛传染性鼻气管炎诊断技术Diagnostictechniquesforinfectiousbovinerhinotracheitis2002一08一27发布2002一12一01实施中华人民共和国农业部发布气7勺NY/T575-2002月U舀牛传染性鼻气管炎(infectiousbovinerhinotracheitis.简称IBx)是II)牛地痊病毒I型(BHV-I)感染家养牛和野生牛引起的一种病毒性传染病,被世界动物卫生组织'WorldOrganizationforAnimalHealth(英).OfficeInternationaldesEpizooties(法),OIE〕列为B类疾病.我国农业部列为二类动物疫病该病广泛分布于世界各地,该病死亡率较低,许多感染牛呈亚临床症状经过往往由于细菌继发感染导致更为严重的呼吸道疾病。本标准所规定的技术与OIE推荐的相应技术一致本标准的附录A、附录B为规范性附录。本标准由农业部畜牧兽医局提出。本标准由个国动物检疫标准化技术委员会归no本标准起草单位:农业部动物检疫所。本标准主要起草人;封启民、李昌琳、李晓成、李其平。NY/r575--2002牛传染性鼻气管炎诊断技术范围本标准规定了牛传染性鼻气管炎(QBR)诊断技术要求。本标准规定的病毒分离方法适用于牛传染性鼻气管炎病毒的分离;微量血清中和试验和酶联免疫吸附试验适用于牛群检疫、流行病学调查及牛群抗体水平的检测。2牛传染性鼻气管炎病毒分离鉴定2门材料准备2门门病料的采集2.1.1.1呼吸道拭子:用灭菌拭子伸人鼻道采取分泌物,然后放人含青霉素1000IU/ml,链霉素」000dig/mL,1,H7.2的Earles液中。也可用棉拭子刮取眼分泌物,并用相同的方法处理。2.1.1.2阴道拭子:用棉拭子采集脓疙性外阴阴道炎早期病变的阴道私液,放人含青霉素1000IU/mL,链霉素1000pg/mL,pH7.2的Earles液中2.1.1.3脑组织样品:在剖检时无菌采集脑组织2.1.1.4流产胎儿组织样品刚死亡的胎儿,无菌采集肺、’肾、脾等各种组织样品,放人每1.0mL含有1000IUr,霉素,1000pg链霉素,pH7.2的Earles液中。2.1.1.5精液:至少采集新鲜精液,或冷冻精液。sm工,置液氮中保存备用212样品的运送采集的样品立即放人4(、冰箱保存,在24h内送到实验室2门.3样品处理2.1.31收到棉拭子样品后,先经冻融两次,并充分振动,拧干棉拭子,将样品液经10000r/min离心10min,取上清液作为组织培养的接种分离材料2.1.3.2组织样品先用Earles液或Hank、液(pH7.2)制成20%的匀浆悬浮液,再经10000r/min离心10min,取上清液作为接种分离材料2.1.33精液冻融两次或超声波裂解,再经10000r/min离心10min,新鲜精液通常对细胞有...