备案号:2747-1999中华人民共和国行业标准日B胭1此傲卜卫的日熟料N型蛋白试验{-,ZBX66033-87DetectionofN-typeprotein本方法适用于酿造酱油半成品熟料中N型蛋白的测定。用N型试验可衡量原料中蛋白质蒸熟程度，评判蒸料的质量。仲裁法1.1设备与消化率测定法同SB/T10319-1999,1.2试剂及溶液1.2.1酶液:与消化率测定法同SB/T10319-1999,1.2.2pH7.2磷酸盐缓冲液三与消化率测定法同，见SB/T10319-1999，1.2.3氯化钠:分析纯。1.3操作1.3.1熟料浆制备:与消化率测定法同SB/T10319-1999.1.3.2水解:精确称取熟料浆6g左右(精确到0.2mg)于150mL锥形瓶中，再加入酶液75mL,氯化钠20g,pH7.2缓冲液20mL摇匀，在瓶口塞上橡皮塞后，置于恒温水浴锅中，45℃保温24h(或48h)甲1.3.3过滤:水解结束后，过滤或离心分离。清液在沸水浴中加热至90"C，用冷水急速冷却，再过滤或离心分离。1.3.4比色:吸取上述清液2mL于试管中，再加入蒸馏水10mL，把试管置沸水浴中加热5min，立刻在冷水中急速冷却。试管中出现混浊或沉淀，N型为阳性。若要定量分析，可用浊度计或比色计测定，并用未煮沸的上清液作空白对照。2近似法2.1设备及试剂:和仲裁法相同。22操作2.2.1熟料浆制备:与消化率测定法同SB/T10319-19992.2.2水解:与消化率测定法同SB/T10319-199910国家国内贸易局1999-04-15批准1999-04-15实施239$B/T109傲卜18682.2.3加盐:N型试验可和消化率测定同时做。水解结束后，在锥形瓶中加入氯化钠20g，摇匀，使氯化钠溶解.冷却后定容至100mL，过滤或离心分离后，用于消化率测定(38/T10319-199朱2.2.4过滤:把余下的约一半水解液振摇20min，再过滤或离心分离。清液在沸水浴中加热至90'C,再用冷水急速冷却，再过滤或离心分离。2.2.5吸取第二次过滤或离心的清液2mL于试管中，再加入蒸馏水lOmL,置试管于沸水浴中加热5min，立刻在冷水中急速冷却。试管中出现混浊或沉淀，N型为阳性。附加说明:本标准由一国家国内贸易.局提出。本标准由上海市酿造科学研究所起草。本标准主要起草人须凤高。240
