ICS11.220CCSB4115内蒙古自治区地方标准DB15/T2905—2023羊副流感病毒3型检测技术规范Technicalspecificationfordiagnosticofcapineparainfluenzavirustype32023-03-10发布2023-04-10实施内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/T2905—2023I前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。本文件起草单位：内蒙古大学、内蒙古蒙微生物科技有限公司、金宇保灵生物药品有限公司、内蒙古自治区动物疫病预防控制中心、内蒙古科技大学包头师范学院、吉林农业科技学院。本文件主要起草人：王炜、马艳华、王镓磊、赵丽霞、杨昱萍、郭宇、韩四娥、郭利、武有志、王岩、萨如拉、高登军、王旭红、胡薇。DB15/T2905—20231羊副流感病毒3型检测技术规范1范围本文件规定了绵羊、山羊副流感3型的临床诊断、病原分离、RT-PCR、ELISA方法的诊断技术要求。本文件适用羊饲养场（户）和动物疫病检疫、诊疗单位对羊副流感病毒3型的检测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。羊副流感病毒3型caprineParainfluenzavirustype3，CPIV3属于副黏病毒科，呼吸道病毒属成员，为有囊膜的单股负链RNA病毒（见附录A中图A.1）。4临床诊断感染羊主要临床症状表现为发热（体温≥40℃）、呼吸困难、流浆液性或黏脓性鼻液和咳嗽等呼吸道症状。病理剖检可见肺部实变。5实验室诊断病毒分离5.1.1试剂耗材牛肾细胞系（MDBK细胞系）、棉签、FBS、DMEM培养基、青霉素、链霉素、细胞培养板。5.1.2仪器电子天平、研磨仪、台式冷冻离心机、生物安全柜、CO2培养箱、倒置显微镜、冰箱。5.1.3病料采集DB15/T2905—202325.1.3.1鼻拭子用无菌棉签刮取鼻道分泌物，然后放入3mL～5mL含1000IU/mL青霉素1000µg/mL链霉素的DMEM培养基的冻存管中，编号，记录，于2℃～8℃条件下保存并尽快送往实验室。5.1.3.2血清使用非抗凝采血管采集新鲜血液2mL～5mL，静置分离血清，编号，记录，于2℃～8℃条件下保存并尽快送往实验室。5.1.3.3肺组织疑似因CPIV3感染死亡的羊，按照NY/T541采集肺组织样品...
