SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1193-2003基因检验实验室技术要求Generalrequirementsforthelaboratoriesforgenedetectionandidentification2003-03-17发布2003-09-01实施中华人民共和国.*国家质量监督检验检疫总局ocICJSN/T1193-2003.占J门.‘‘种月U舌本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:国家质量监督检验检疫总局动植物检疫实验所、中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、中华人民共和国广州出人境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局。本标准主要起草人:朱水芳、陈红运、黄文胜、覃文、章桂明、曹际娟。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。SN/T1193-2003基因检验实验室技术要求范围本标准规定了转基因产品检测实验室总体要求、质量控制和质量保证。本标准适用于转基因产品检测实验室的建设和质量控制。2术语、定义和缩略语下列术语、定义和缩略语适用于本标准。2.1转基因产品geneticallymodifiedorganisms,GMOs;biotechnologymodifiedproducts又叫生物技术产品。指用基因工程技术或者其他现代生物技术改变基因组构成的动物、植物、微生物及其产品。2.2聚合酶链式反应polymerasechainreaction聚合酶链式反应,简称PCR。用一对寡核昔酸引物、四种脱氧核糖核昔酸(dNTPs),在合适的温度、离子条件及耐热DNA聚合酶催化下,在体外人工合成特异的模板DNA片段的过程。2.3实时荧光PCRreal-timefluorescentPCR,kineticPCR,homogeneousPCR在传统的PCR反应体系中,加人了扩增模板特异性的荧光标记杂交探针,同时在常规的PCR仪上增加了荧光信号检测系统,使得PCR扩增产物的特异性及数量检测与PCR扩增同步进行。实时荧光PCR探针有多种,常用的有分子信标(molecularbeacon),Tagman探针和杂交双探针等。2.4dUTP-DNA糖基化酶UNG,Uracil-DNAglycosylase一种特殊的DNA水解酶,它只水解掺有dUTP的DNA。此酶防污染的条件是:在PCR扩增过程中用dUTP取代dTTP;在PCR开始前用UNG酶处理PCR扩增反应液;在碱性条件下高温<950C)断裂DNA.2.5缩略语2.5.1PCR:polymerasechainreaction,聚合酶链式反应简称PCR,2.5.2DNA:deoxyribonucleicacid,脱氧核糖核酸。2.5.3dNTP:deoxyribonucleosidetriphosphate,脱氧核昔酸三磷酸。2.5.4UNG:uracil-DNAglycosylase,尿喃吮DNA-糖基化酶。2.5.5dATP:deoxyadenosinetriphosphate,脱氧腺昔三磷酸。2.5.6dTTP:deoxythymidinetriphosphate,脱氧胸昔三磷酸。2.5.7dUTP:deoxyuridinetriph...