ICS11.220B41DB45广西壮族自治区地方标准DB45/T1508—2017H6亚型禽流感病毒的检测荧光定量反转录聚合酶链反应法Real-timefluorescentquantitativeRT-PCRfordetectionofH6subtypeavianinfluenzavirus2017-04-15发布2017-05-15实施广西壮族自治区质量技术监督局发布DB45/T1508—2017I目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12术语和定义........................................................................13试剂、仪器及耗材..................................................................14检测方法..........................................................................25结果判定..........................................................................3附录A(规范性附录)引物序列及反应曲线..............................................4附录B(资料性附录)试剂盒成分......................................................5DB45/T1508—2017IIDB45/T1508—2017III前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由广西壮族自治区水产畜牧兽医局提出并归口。本标准起草单位:广西壮族自治区动物疫病预防控制中心。本标准主要起草人:莫胜兰、梁媛、邹联斌、张步娴、屈素洁、胡杰、施开创、李军。DB45/T1508—20171H6亚型禽流感病毒的检测荧光定量反转录聚合酶链反应法1范围本标准规定了荧光定量反转录聚合酶链反应法检测H6亚型禽流感病毒的术语和定义、试剂、仪器及耗材、检测方法及结果判定。本标准适用于H6亚型禽流感病毒的检测。2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2.1禽流感病毒avianInfluenzavirus感染禽类为主的流感病毒,属于正黏病毒科,其基因组为单股负链RNA。2.2H6亚型禽流感病毒H6avianInfluenzavirus禽流感病毒根据血凝素(HA)的不同,可以分为16个HA亚型,H6亚型禽流感病毒是其中的一种。2.3反转录reversetranscription以RNA为模板合成cDNA的过程。2.4荧光定量聚合酶链反应real-timefluorescentquantitativepolymerasechainreaction指在反应体系中加入特异性的引物和含有荧光基团的探针以扩增特定模板的PCR技术,同时利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。3试剂、仪器及耗材3.1试剂3.1.1...