ICS65.020.20CCSB05DB15内蒙古自治区地方标准DB15/T2045—2020甜菜组培快繁技术规程Technicalcodeofpracticeofcultureandrapidpropagetiononsugarbeet2020-12-24发布2021-01-24实施内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/T2045—2020I前言本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会(SAM/TC20)归口。本文件起草单位:内蒙古自治区农牧业科学院。本文件主要起草人:白晨、李晓东、张惠忠、张自强、王良、韩平安、张必周、赵尚敏、付增娟、鄂圆圆、郑文哲、张辉。DB15/T2045—20201甜菜组培快繁技术规程1范围本文件确立了培养基、外植体的获取、灭菌与萌发、无菌苗获取、甜菜组培扩繁和移栽等技术要求。本文件适用于甜菜组培快繁技术操作的全过程。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语与定义下列术语和定义适用于本文件。3.1种球bulb甜菜的果实。3.2腋芽axillarybud发生于叶的近轴面与茎的夹角处的定芽。3.3花序inflorescence花序轴及其着生在上面的花的通称。4培养基4.1琼脂粉培养基用于甜菜种球的萌发。成分为(1L):琼脂粉7.5g。4.2诱导分化培养基用于甜菜无菌苗诱导分化培养。成分为(1L):MS培养基4.74g,蔗糖30g,NAA(萘乙酸)0.7mg,KT(激动素)1.2mg,琼脂粉7.5g。4.3继代培养基DB15/T2045—20202用于甜菜无菌苗的继代培养。成分为(1L):MS培养基4.74g,蔗糖30g,NAA0.5mg,KT0.4mg,琼脂粉7.5g。4.4生根培养基用于甜菜无菌苗的生根培养。成分为(1L):MS培养基4.74g,蔗糖30g,NAA1.2mg,琼脂粉7.5g。5外植体的获取5.1种球的获取+选取健康、籽粒饱满、外观完好的甜菜种球。5.2腋芽的获取在甜菜生殖生长期,选择生长健壮、无损伤、无病虫害的甜菜植株,剪取幼嫩主枝或侧枝。5.3花序的获取在甜菜生殖生长期,选择生长健壮、无损伤、无病虫害的甜菜植株,剪取现蕾花序的末端约20cm。6灭菌与萌发6.1灭菌前准备制备无菌水、75%酒精,0.1%升汞,80%次氯酸钠。6.2种球消毒将甜菜种球磨光,用百菌清(烟剂型)密闭熏蒸24h后,在超净工作台中移至灭过菌的三角瓶中,随后用75%酒精消毒2min,无菌水漂洗3次,接着用0.1%的升汞处理20min,无菌水漂洗3次,最后将消毒后的种子接种于琼脂粉培养基上,每三角瓶(100ml)25粒。6.3腋芽消毒取回的主枝或侧枝剪成保留1~2个腋芽小段,装入烧杯放在自来水下冲洗1h...