ICS01.120A00DB34安徽省地方标准DB34/T3489—2019猪瘟病毒抗体快速检测方法镧系荧光免疫层析法TheRapidDetectionMethodsforAntibodiestoClassicalSwineFeverVirusLanthanideFluorescenceImmunochromatographicAssay文稿版次选择2019-12-25发布2020-01-25实施安徽省市场监督管理局发布DB34/T3489—2019I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽农业大学提出并起草。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位:安徽农业大学、安徽浩翔农牧有限公司、安徽冠华农牧有限公司、安徽禾丰浩翔农业发展有限公司、安徽省动物疫病预防与控制中心、阜阳市动物卫生监督所、怀宁县动物疫病预防与控制中心、巢湖市畜牧兽医局、六安市动物疫病预防与控制中心、成都微瑞生物科技有限公司。本标准主要起草人:李郁、何长生、占松鹤、谢玉洁、程竹兵、李春芬、程圣芳、高亚飞、段倩倩、孙裴、袁献宇、高亚成、蒋广志、张和森。DB34/T3489—20191猪瘟病毒抗体快速检测方法镧系荧光免疫层析法1范围本标准规定了猪瘟病毒抗体快速检测方法镧系荧光免疫层析法的原理、仪器和试剂、样品采集与处理、操作方法、结果计算、生物安全和防污染措施。本标准适用于猪瘟病毒抗体的快速检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB19489实验室生物安全通用要求GB/T27401实验室质量控制规范动物检疫NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范3原理镧系荧光免疫层析法(lanthanidefluorescenceimmunochromatographicassay,LFIA)快速检测猪瘟病毒抗体,系采用镧系元素铕(Eu3+)荧光纳米微球作荧光示踪物,分别标记猪瘟病毒重组E2蛋白抗原和鸡IgY,并埋置在标记垫内。硝酸纤维素膜上检测线(T)包被猪瘟病毒重组E2蛋白抗原、参考线(C)包被山羊抗鸡IgY抗体。当血清样品抗体与镧系元素铕(Eu3+)荧光纳米微球标记的猪瘟病毒重组E2蛋白抗原接触反应后形成免疫复合物,继续与硝酸纤维素膜上检测线(T线)包被的猪瘟病毒重组E2蛋白抗原反应形成复合物;其余物质向前层析,在C线处包被的山羊抗鸡IgY抗体与镧系元素铕(Eu3+)荧光纳米微球标记的鸡IgY结合形成免疫结合物。最后用镧系荧光分析仪读取检测卡上的荧光信号,经计算即可得出猪瘟病毒抗体效价。4仪器与试剂4...