中华人民共和国国家标准肉与肉制品维生素A含盘测定GB/T9695.26一91Meatandmeatproducts-Methodforde傲ermin皿NonofvitaminAcontent1主肠内容与适用范围本标准规定了肉和肉制品中维生素A含量的测定方法。本标准适用于肉和肉制品中维生素A含量的测定。2引用标准GB9695.19肉与肉制品取样方法3原理样品皂化后，用石油醚提取不皂化的维生素A，浓缩后、用高效液相色谱荧光检测器.激发波长340nm，发射波长460nm，分离测定维生素A，用标准外标法计算样品中维生素A的含量。4试剂4.14.24.34.44.54.64.74.8除特别标明外所用试剂全为分析纯，所用水应为蒸馏水或同等纯度的水。氢氧化钾(GB2306):50%溶液;抗坏血酸:10YO溶液;无水乙醉(GB678);石油醚:沸程30-60-C;无水硫酸钠;异丙醉;甲醉(GB683):重蒸后使用;维生素A标准溶液:0.2mg/mL称取维生素A标准品10.0mg，用异丙醉溶解，移至50mL棕色容量瓶中，用异丙醉稀至刻度。当天配制。5仪器和设备5.1实验室常规设备;5.2绞肉机:孔径不超过4mm;5.3旋转蒸发器;5.4液相色谱仪，带荧光检测器;5.5色谱柱:十八烷基键合固定相柱或其他能分离维生素A的柱子。国家技术监督局1991一03一26批准1991一12一01实施GB/T9695.26一916试样6.1按GB9695.19取样6.2取有代表性的试样200g，于绞肉机中至少纹两次使其混匀，试样应尽快分析。7.115too分析步骇皂化维生素A易被光破坏，试验应避光操作。称取。.5-5g试样于150mL棕色皂化瓶中，加人10%抗坏血酸溶液5mL,500a氢氧化钾溶液mL，乙醉30mL混匀，于80℃水浴上回流加热30^-60min，使试样溶液清撤，完全皂化后于流水中冷了.2提取将皂化后的试样溶液移入125mL分液漏斗中，用30mL石油醚分数次洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗中，塞上塞子，轻摇分液漏斗，避免乳化。静置，待分层后，将水层放入第二个分液漏斗中，醚层留在第一个分液漏斗中。于第二个分液漏斗中倒人10mL石油醚，进行第二次提取，如此进行3^-4次，石油醚层并入第一个分液漏斗中石油醚层反复用水洗涤，直至水层不呈碱性(用PH试纸检查)为止，弃去水层。将分液漏斗中石油醚层经过无水硫酸钠脱水，撼入干燥的棕色圆底烧瓶中。再用石油醚洗涤无水硫酸钠和分液漏斗，洗液并入棕色圆底烧瓶中。7.3分析试样的准备将盛有石油醚提取液的圆底烧瓶与旋转蒸发器连接，于50^-60℃水浴上减压回收石油醚，待瓶内只剩约l-2mL液体时，取下烧瓶，用氮气吹干剩余液体，立即加入2.0mL异丙醉溶液，摇匀，溶解瓶中维生素A，塞上塞子.以防溶剂挥发，此为色谱分析...
