中华人民共和国国家标准茶游离氨基酸总量测定GB/T8314—87Tea-Determinationoffreeaminoacidscontent━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━本标准适用于茶叶中游离氨基酸总量的测定。茶叶水浸出物中具有α-氨基的有机酸且呈游离状态存在者,均称茶叶游离氨基酸。1原理氨基酸在pH8.0的条件下与茚三酮共热,形成紫色络合物,用分光光度法在特定的波长下测定其含量。2仪器和用具实验室常规仪器及下列各项:2.1分析天平:感量0.0001g。2.2分光光度仪。3试剂和溶液3.1pH8.0磷酸盐缓冲液:按GB8313—87《茶茶多酚测定》中3.2的规定,配制1/15M磷酸氢二钠(3.2.1)和1/15M磷酸二氢钾(3.2.2)溶液。然后取1/15M的磷酸氢二钠溶液95mL和1/15M磷酸二氢钾溶液5mL,混匀。3.22％茚三酮溶液:称取水合茚三酮(纯度不低于99％)2g,加50mL水和80mg氯化亚锡(GB638—78,分析纯),搅拌均匀。分次加少量水溶解,放在暗处,静置一昼夜,过滤后加水定容至100mL。3.3茶氨酸或谷氨酸标准液:称取100mg茶氨酸或谷氨酸(纯度不低于99％)溶于100mL水中,作为母液。准确吸取5mL母液,加水定容至50mL作为工作液(1mL含茶氨酸或谷氨酸0.1mg)。4操作方法4.1取样按GB8302—87《茶取样》规定取样。4.2试样的制备按GB8303—87《茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定》的规定,制备试样。4.3测定步骤4.3.1试液的制备按GB8305—87《茶水浸出物测定》中3.4.1的规定,制备试液。4.3.2测定准确吸取试液(4.3.1)1mL,注入25mL容量瓶中,加0.5mLpH8.0缓冲液(3.1)和0.5mL2％茚三酮溶液(3.2),在沸水浴中加热15min。待冷却后加水定容至25mL。放置10min后,用5mm比色杯,在570nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)。4.3.3氨基酸定量标准曲线的制作分别吸取0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL氨基酸工作液(3.3)于一组25mL容量瓶中,各加水4mL、茚三酮溶液(3.2)0.5mL和缓冲液(3.1)2mL,在沸水浴中加热15min,冷却后加水定容至25mL,按4.3.2的操作测定吸光度(A)。将测得的吸光度与对应的茶氨酸或谷氨酸浓度绘制标准曲线。注:制作标准曲线时,所用蒸馏水,必须是二次蒸馏水。5结果计算5.1计算方法和公式茶叶中游离氨基酸含量,以干态质量百分率表示,按下式计算:CL1──×──1000L2游离氨基酸总量(％)＝─────×100M×m式中:L1——试液总量,mL;L2——测定用试样量,mL;M——试样量,g;C——根据4.3.2测定的吸光度从标准曲线上查得的茶氨酸的mg数;m——试样干物质含量百分率,％。如果符合重复性...
