中华人民共和国国家标准肉与肉制品维生素B2含量测定GB/T9695.28一91Meatandmeatproducts-MethodfordeterminationofvitaminB2content1主要内容与适用范围本标准规定了肉与肉制品中维生素B:的测定方法。本标准适用于肉与肉制品中维生素B:含量的测定。2引用标准GB9695.19肉与肉制品取样方法3原理试样用稀酸经121-123℃高压釜处理，提取维生素B2(核黄素)，维生素B:在中性或酸性溶液中经照射产生蓝色荧光，荧光强度与维生素B:的浓度成正比，以此测定维生素B2的含量。4试剂4.1盐酸(GB622):0.1mol/L溶液;4.2氢氧化钠(GB629):lm01/1,溶液;4.3冰乙酸(GB676):0.02mol/L溶液;4.4冰乙酸(GB676);4.5高锰酸钾(GB643):4写溶液;4.63%过氧化氢(GB6684):3%溶液;4.7连二亚硫酸钠;4.8维生素B:标准溶液4.B.1标准贮备液100ug/mL:将50.0mg维生素B。标准品溶于0.02mol/L乙酸溶液中并定容至500ml,棕色容量瓶中。(可在水浴上加热溶解，冷却后再定容。)4.8.2标准工作液0.05pg/mL:吸取标准贮备液1.00mL于100ml,棕色容量瓶中定容、摇匀。吸取此液5.00mL于100mL棕色容量瓶中用水定容、摇匀，用时现配。5仪器和设备5.15.25.35.4实验室常用设备;绞肉机:孔径不超过4高压釜:温度可控制在荧光分光光度计。121-123-C;国家技术监督局1991一03-26批准1991一12一01实施GB/T9695.28一916试样6.1按GB9695.19取样。6.2取有代表性的试样200g，于绞肉机中至少绞两次使其混匀，贮于密闭容器中备用。了分析步骤了.飞试样前处理称取5g(精确到。001g)试样于250mL具塞锥形瓶中，加入0.1mol/L盐酸溶液10mL，塞好瓶盖用力振摇，使试样与酸混匀，再用0.1mol/L盐酸溶液冲洗瓶壁，总体积约为60mL。将锥形瓶放入121一1230C高压釜中加热30min，取出冷却至室温。用1mol/L氢氧化钠溶液调pH为4.0-4.5(用精密pH试纸检查)使蛋白质沉淀。将其全部转移到500mL棕色容量瓶中定容、摇匀‘过滤，滤液避光备用。了.2测定吸取备用滤液，维生素B2标准工作液各10.00mL分别加入25mL棕色试管中，加入冰乙酸1mL.在不断摇动下加4%高锰酸钾溶液4滴，使溶液显紫色，静置2min。然后再滴加3%过氧化氢溶液2滴，摇匀使紫色在10s内退去。在激发波长440nm，发射波长565n处测定其荧光强度I和I'在各试管中分别加入连二亚硫酸钠20mg，轻摇，JOs内测其最小荧光强度Q和Q,。8分析结果的计算计算公式:1一Q尸一Q,Cx500x10-3爪义100式中:X—样品中维生素B:含量,mg/loog;1一试样的荧光强度;1,一一维生素BZ标准的荧光强度;Q一试样加连二亚硫酸钠后的...
