中华人民共和国国家标准肉与肉制品维生素Bl含量测定GB/T9695.27一91Meatandmeatproducts---Methodfordeterminationofvitamin81content1主肠内容与适用范围本标准规定了肉与肉制品中维生素B,含量的测定方法。本标准适用于肉与肉制品中维生素B:含量的测定。2引用标准GB9695.19肉与肉制品取样方法3原理试样用酸水解使维生素B,(硫胺素)游离,维生素B:经酶解、纯化后在碱性高铁氰化钾作用下定量氧化成具有蓝色荧光的硫色素。在激发波长365nm,发射波长435nm处测定其荧光强度,荧光强度与硫色素含量成正比,以此计算维生素B,的含量。4试剂所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水或同等纯度的水.4.1乙酸钠(GB694):2mol/L溶液。4.2盐酸(GB622):0.1mot/L溶液。4.3澳甲酚绿pH指示剂:变色范围:pH值为4.0(绿),-5.8(蓝)d0.1g指示剂与。05mol/L氢氧化钠溶液2.8MI,在玛瑙乳钵中研磨溶解,以水稀至200mLo4.4澳酚蓝pH指示剂:变色范围:pH值为3.0(黄)-4.6(蓝)。。1g指示剂与。.05mol/L氢氧化钠溶液3ml,在玛瑙乳钵中研磨溶解,以水稀至250mLo4.5高峰淀粉酶:10%溶液4.6氯化钾(GB646):25%溶液.4.1酸性氯化钾湘夜:每升氯化钾溶液中加入8.5mL浓盐酸。4.8氢氧化钠(GB629):15Yo溶液。4.9铁氰化钾(GB644):1%溶液。4.10氧化剂:100铁氮化钾溶液1mL,用150/n氢氧化钠溶液稀释至100L。临用前配制。4.11异丁醇。4.1295%乙醉(GB679)c20%溶液。4.13酸性乙醇,20%乙醇溶液用。1mot/L盐酸溶液调节pH为3.4-4.34.14人造沸石:市售品要经活化处理活化方法:将粒度40.60目的人造沸石置于烧杯中,加约5倍量的热水搅拌,静鬓后倾出上清液弃去。重复此操作直至上清液透明。国家技术监督局1991一03一26批准接着加入5倍量的3%乙酸溶液搅拌浸泡10min,静置后倾去上清1991一12一01实施GB/T9695.27一91液,重复此操作3次。然后加入约5倍量热的酸性抓化钾溶液,在沸水浴中加热25min,弃去L清液,加3%乙酸溶液洗涤两次后,用水反复洗至无抓离子为止(用硝酸银溶液检查)。将处理过的人造沸石浸没于水中保存,也可于80℃干燥备用。维生素B,回收率要大于85%e4.15维生素B,标准溶液4.15.1标准贮备液100ug/mL,称取50.0mg维生素B,标准品于500mL棕色容量瓶中,用酸性乙醇稀释至刻度,置冰箱保存。4.15.2标准工作液10;ig/mL;取标准贮备液10.OmL,用酸性乙醉定容至100mL棣色容量瓶中。5仪器和设备5.1实验室常规设备;5.2纹肉机:孔径不超过4mm;5.3培养箱:可控制温度45^-500C;5.4棕色具塞试管;25-40mL;5.5荧光分光光度计;5.6...