GB/r17999.8-1999前言用血清平板凝集试验监测鸡白痢沙门氏菌感染,结果难以判定时,可用试管凝集试验(TA)进行复检,为此本标准规定了SPF鸡试管凝集试验。SPF鸡微生物学质量控制国家系列标准,包括SPF鸡微生物学监测总则和9种SPF鸡微生物学检测方法.本标准为《SPF鸡试管凝集试验》。SPF鸡微生物学检测方法还包括以下部分:GB/T17999.1-1999SPF鸡红细胞凝集抑制试验;GB/T17999.2-1999SPF鸡血清中和试验;GB/T17999.3-1999SPF鸡血清平板凝集试验;GB/T17999.4-1999SPF鸡琼脂扩散试验;GB/T17999.5-1999SPF鸡酶联免疫吸附试验;GB/T17999.6--1999SPF鸡胚敏感试验;GB/T17999.7-1999SPF鸡鸡白痢沙门氏菌检验;GB/T17999.9-1999SPF鸡间接免疫荧光试验。本标准由中华人民共和国农业部、国家科学技术部提出本标准由农业部畜牧兽医司归口。本标准起草单位:中国兽药监察所、农业部实验动物中心。本标准主要起草人:张学琴、陈德威、赵立红。中华人民共和国国家标准SPF鸡试管凝集试验Gs/T17999.8一1999SPFchicken-Tubeagglutinationtest1范围本标准规定了试管凝集试验所用试剂、材料,操作程序及结果判定等。本标准适用于SPF鸡感染鸡白痢沙门氏菌或鸡伤寒沙门氏菌后的抗体监测。2原理同血清平板凝集试验,亦是细菌性抗原与相应的抗体结合后在适量电解质参与下,经过一段时间出现肉眼可见的凝集现象,只是结果判定以凝集价表示3试剂和材料3.1抗原:试管凝集试验用鸡白痢一鸡伤寒抗原(含菌10亿/mL)32阳性、阴性血清。13被检血清口3.4o.5Y,石炭酸生理盐水:了,炭酸59;a化钠8.59;蒸馏水1000mL;混合溶化,6.897Pa20min消毒备用15常规血清学试验用品。4操作程序4.1每份被检血清需要5支小试管(口径8mm-10mm)。第1管加石炭酸生理盐水1.8mL,其余管各加Iml。4.2第1管加被检血清。.2mL,与石炭酸生理盐水混匀(使成1:10稀释)。取1mL移至第2管,混匀后连续倍比稀释至第4管,最后从第4管内吸出1mL弃去。如此各管血清最后稀释依次为I:20,1:40,1,80,1:160,1:3204.3各管加入抗原液1mL4.4振荡混匀后置37C感作24h,观察结果。4.5梅次试验须设三种对照各一份。4.5.1抗原对照:在试管中加抗原液1mL,再加。.5%石炭酸生理盐水1mLo4.5.2阳性血清对照阳性血清稀释至原来效价,每管加入抗原液1mL4.5.3阴性血清对照:操作方法同被检血清。4.5.4全部试管振荡后,置37`C24h后移入4'C-8C冰箱过夜,使结果更易判定4.6结果观察国家质量技术监督局1999一11-10批准2000一04一O1实施GB/T17999.8-19994.6.1从...