GB/e17999.2--1999前言本标准参照美国SPAFAS公司的血清中和试验(SN)操作规程编制而成。SPF鸡微生物学质量控制国家系列标准,包括SPF鸡微生物学监测总则和9种SPF鸡微生物学检测方法。本标准为《SPF鸡血清中和试验》。SPF鸡微生物学检测方法还包括以F部分:GB/T17999.1-1999SPF鸡红细胞凝集抑制试验;GB/T17999.3--1999SPF鸡血清平板凝集试验;GB/丁17999.4-1999SPF鸡琼脂扩散试验;GB/T17999-5-1999SPF鸡酶联免疫吸附试验;GB/T17999.6一1999SPF鸡胚敏感试验;GB/T17999.7-1999SPF鸡鸡白痢沙门氏菌检验;GB/T17999.8--1999SPF鸡试管凝集试验;GB/T17999.9-1999SPF鸡间接免疫荧光试验。本标准山中华人民共和国农业部、国家科学技术部提出本标准由农业部畜牧兽医司归n本标准起草单位:农业部实验动物研究中心、山东省农科院家禽研究所本标准主要起草人赵立红、陈德威、张秀美、秦卓明。中华人民共和国国家标准SPF鸡血清中和试验GB/T17999.2-1999SPFchicken-Serumneutralizationtest范围本标准规定了血清中和试验所用试剂、材料,操作程序及结果判定等。本标准适用fSPF鸡感染以下病毒后的中和抗体的监测:禽脑脊髓炎病毒(AvianEncephalomyelitisVirus)、传染性支气管炎病毒(InfectiousBronchitisVirus)、传染性喉气管炎病毒(InfectiousLaryngotracheitisVirus)、传染性法氏囊病病毒(InfectiousBursalDiseaseVirus),2原理中和试验系指有生物活性的病毒与相应的抗体结合后,可失去原有的生物活性的中和反应。中和反应不仅有高度特异性,巨具有严格的量的关系。因此可用中和试验鉴定病毒,也可用于相应抗体的定量检测。3试剂和器材3.1试剂3.1.1蛋白肪磷酸肉汤。3.1.2青霉素/链霉素(双抗)液。3.1.3300碘溶液。3.1.4SPF蛋3.2器材I2门蛋钻(打孔器)。3.2.26'‘针头。3.2.37:'针头。3.2.4混合器。I2.5照蛋器。3.2.6常规实验设备。4操作程序4门试验准备4.1.1血清样品处理被检血清和阳性对照血清经56C30min--45min灭活,保存于一20C条件下备用。4.1.2SPF蛋准备4.1.2.1共需12枚蛋4门.2.2照蛋检查胚体活力,试验只用健康胚4.1.2.3根据病毒种类选择篷f日〕兰丝立竺塑垫迎些逛鱼塑迷鱼喳堕二一国家质量技术监督局1999一11一10批准2000一04一01实施GB/'r17999.2-1999表1病毒禽脑脊髓炎病毒传染性支气管炎病毒传染性法氏囊病病毒传染性喉气管炎病毒注;YS一卵黄囊;CAS病毒接种胚龄与方法胚龄,a5-79-11109-11绒毛尿囊膜。接种方法YsCASCAMCA片尿囊腔瓜AM4.1.34门.3门4.1.32稀释病毒...