中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T5191—2020禽肾炎检疫技术规范Quarantineprotocolforaviannephritis中华人民共和国海关总署发布ICS11.220CCSB412020-12-30发布2021-07-01实施ISN/T5191—2020前言本文件按照GB/T1.1—2020的规定起草。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中华人民共和国天津海关、锦州医科大学、中华人民共和国青海岛海关。本文件主要起草人:王乃福、赵微、刘洋、胡炜、陈小金、黄晨、陈本龙、董志珍、赵祥平。1SN/T5191—2020禽肾炎检疫技术规范1范围本文件规定了禽肾炎的病毒分离及鉴定、反转录-聚合酶链式反应、实时荧光反转录-聚合酶链式反应和间接酶联免疫吸附试验的技术要求。本文件适用于禽肾炎的检疫。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析试验室用水规格和实验方法GB19489实验室生物安全通用要求3术语、定义和缩略语本文件没有需要界定的术语和定义。下列缩略语适用于本文件。AN:禽肾炎(aviannephritis);ANV:禽肾炎病毒(aviannephritisvirus)。4临床诊断4.1禽肾炎简介禽肾炎简介参见附录A。4.2临床症状本病可明显抑制1月龄以内雏鸡生长发育和增重,其他症状不明显。一般呈一过性隐性感染,本病经人工接种无特殊病原微生物雏鸡后,血浆中尿酸盐浓度高于正常浓度的2~10倍,21d后恢复正常。4.3病理变化本病的病理变化主要表现于肾脏,其他脏器一般没有变化。随年龄增大,病变程度减轻,4日龄内的雏鸡病变最为严重,甚至会出现死亡情况。剖检死亡的雏鸡,见到肾脏、脾脏和腹膜表面及腿部筋腱周围大量的尿酸盐沉积,2月龄仅发生较轻肾炎病变。根据流行病学、临床症状和病理变化可做出禽肾炎的初步诊断,进一步的确诊有赖于实验室诊断。5实验室诊断5.1生物安全措施2SN/T5191—2020试验环境和防护要求见GB19489。5.2病原分离及鉴定5.2.1材料和试剂5.2.1.1器材生物安全柜、离心机、二氧化碳培养箱、冷冻高速离心机、研磨器、倒置显微镜等。5.2.1.2水符合GB/T6682中一级水要求。5.2.1.3试剂胰酶消化液、细胞生长液、细胞维持液、双抗液,具体配制见附录B.1~B.4。5.2.1.4细胞鸡肾细胞(CKC)。5.2.2病毒分离培养5.2.2.1样品采集和制备5.2.2.1.1未出现临床症状时,活禽无菌采集病鸡泄殖腔拭子(需带...