中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T5186—2020鲍脓疱病检疫技术规范Quarantineprotocolforabalonepustuledisease2020-12-30发布2021-07-01实施ICS05.150CCSB41中华人民共和国海关总署发布SN/T5186—2020I前言本文件按照GB/T1.1—2020的规定起草。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中华人民共和国海口海关、中华人民共和国厦门海关。本文件主要起草人:吴山楠、庞道标、郭书林、黄纪徽、冯斯敏、林道颖、张亮亮、陈平亚、李丹丹。SN/T5186—20201鲍脓疱病检疫技术规范1范围本文件规定了鲍脓疱病的临床诊断、病原分离、生化鉴定、PCR检测法和荧光PCR检测法。本文件适用于鲍脓疱病的病原检测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求GB19489实验室生物安全通用要求GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T18088出入境动物检疫采样GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求SC/T7103水生动物产地检疫采样技术规范3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4概述鲍脓疱病由河弧菌感染所致,主要感染3cm~5cm的稚幼鲍,夏季连续高温季节发病频繁,持续时间长,死亡率高,在海南省及全国各地造成极其严重的经济损失。河弧菌是一种嗜盐菌,革兰染色阴性,顶端单鞭毛,具动力。本菌可产生肠毒素和细胞毒素。本菌对多数广谱抗菌药物敏感,但耐青霉素及头孢类抗生素。患脓疱病的鲍可见足肌上有若干个微微隆起的白色脓疱。脓疱的形状基本上为三角形,病灶是从腹足的下表面开始逐渐扩大、深入到足的内部。开始时,病灶较小,随着病程的进展,病灶逐渐扩大。临床检疫要求参见附录A。5.试剂和仪器设备5.1试剂5.1.1除另有规定外,试验所需所有化学试剂均应为分析纯。5.1.2试验用水应符合GB/T6682中一级水的规格,用于DNA提取及PCR试验的试验用水需用灭菌双蒸水。5.1.3培养基。SN/T5186—202025.1.4生化鉴定试剂:精氨酸二氢酶、赖氨酸脱梭酶、鸟氨酸脱梭酶、脲酶、糖发酵管、微量生化管、生化鉴定试剂条或试剂盒等。5.1.5细菌基因组提取试剂盒。5.1.6PCR引物序列如下:——F1:5’-GCCTGACTCAAGCCATCTCAACCC-3’;——R1:5’-CTGTTGGTTGCCGTCATACTGCCT-3’。5.1.7实时荧光PCR引物和...