中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T5193—2020兔球虫病检疫技术规范Quarantineprotocolforrabbitcoccidiosis2020-12-30发布2021-07-01实施ICS11.220CCSB41中华人民共和国海关总署发布中华人民共和国出入境检验检疫开本880×12301/16印张1字数30千字2021年1月第一版2021年1月第一次印刷印数1—500书号：155175·130定价18.00元兔球虫病检疫技术规范行业标准SN/T5193—2020***北京市朝阳区东四环南路甲1号（100023）编辑部：（010）65194242-7509中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷中国海关出版社有限公司出版发行网址www.customskb.com/bookSN/T5193—2020I前言本文件按照GB/T1.1—2010的规定起草。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国广州海关、中华人民共和国太原海关。本文件主要起草人：吕继洲、袁向芬、张舟、吴绍强、邓艳、王彩霞、巩红霞、张永宁。SN/T5193—20201兔球虫病检疫技术规范1范围本文件规定了兔球虫病检疫时的样品采集、病原形态学观察以及PCR检测等技术规范。本文件适用于活兔、带肝脏兔胴体球虫感染情况的检测，也适用于兔养殖场兔球虫病的流行病学调查和监测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规模和试验方法3术语、定义和缩略语本文件没有需要界定的术语和定义。下列缩略语适用于本文件。DNA：脱氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAcid）PCR：聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction）SDS：十二烷基硫酸钠（SodiumDodecylSulfate）4疫病概述参见附录A。5材料5.1除另有规定外，所用化学试剂均为分析纯。试验用水要求达到GB/T6682中一级水的要求。5.2基因组DNA抽提试剂盒、PCR缓冲液、dNTP、DNA聚合酶、DNAMarker、蛋白酶K、氯化钠、重铬酸钾、三氯甲烷、SDS、异丙醇、琼脂糖、无水乙醇等，均为商品化试剂。5.3饱和氯化钠溶液、2.5%重铬酸钾溶液、0.5%SDS消化液、裂解液、20mg/L蛋白酶K溶液、酚/三氯甲烷/异戊醇溶液、70%乙醇、3mol/L乙酸钠溶液、电泳缓冲液、生理盐水的配制方法见附录B。5.4艾美耳球虫Eimeiaspp.通用引物：ITS1-F：5’-GGGAAGTTGCGTAAATAGA-3’；ITS1-R：5’-CTGCGTCCTTCATCGAT-3’。引物合成后均采用灭菌ddH2O稀释为10μmol/L（具体序列...
