中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4993—2017代替SN/T2032—2007ICS65.020.01B162017-11-07发布2018-06-01实施转基因玉米检测微滴式数字PCR定量方法Detectionofgeneticallymodifiedcorns—QuantitativemethodwithdropletdigitalPCR中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布ISN/T4993—2017前言本标准根据GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：凌杏园、潘广、章桂明、付伟、程颖慧、黄新、向才玉、陈枝楠、朱水芳。1SN/T4993—2017转基因玉米检测微滴式数字PCR定量方法1范围本标准规定了转基因玉米品系MIR162、MON89034、Bt176、Bt11、MON88017、MON810、MON863、T25、MIR604、ES3272、NK603、TC1507、MON87460、59122和GA21微滴式数字PCR定量检测方法。本标准规定了玉米产品中转基因玉米成分含量的计算方法。本标准适于农产品和食品中上述转基因玉米品系的定量检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求GB/T19495.3转基因产品检测核酸提取纯化方法GB/T19495.7转基因产品检测抽样和制样方法GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测3术语、定义和缩略语下列术语和定义适用于本文件。3.1术语和定义微滴式数字PCRdropletdigitalPCR一种核酸单分子扩增技术。一PCR反应管中90μL的油水反应体系被微滴发生器制备成近20000油包水小微滴。当待测双链DNA模板分子数低于一定的数目，模板DNA分子按泊松分布定理分散到各小微滴中。这些含有模板DNA的小微滴（绝大多数仅含一个模板分子）包含了足量的供实时荧光PCR反应所需的所有其他组分如dNTP、TaqDNA聚合酶以及探针和引物等，待荧光PCR反应结束后，逐一检查每个微滴是否有扩增发生，就可以精确测得待测DNA模板的分子数，不同于常规PCR和实时荧光PCR技术，该技术不需要制作标准曲线，也与待测分子PCR扩增效率无关，可以直接测出样品中待测DNA模板的绝对数目，可对产品中转基因成分进行精确定量。3.2缩略语DNA（deoxyribonucleicacid）:能氧核糖核酸。dNTP（deoxyribonucleosidetriphosphate）:...
