中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T5026—2017代替SN/T2032—2007饲料中T-2毒素的测定酶联免疫吸附法DeterminationofT-2toxininanimalfeedingstuffs—Enzyme-linkedimmunosorbentassayICS65.120B462017-11-07发布2018-06-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布ISN/T5026—2017前言本标准按照GB/T1.1—2009及SN/T0001—1995《出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规定》给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国江苏出入境检验检疫局。本标准主要起草人：冯民、朱臻怡、魏云计、王小晋、何健、朱亮亮、罗晓琴。1SN/T5026—2017饲料中T-2毒素的测定酶联免疫吸附法1范围本标准规定了饲料中T-2毒素的酶联免疫吸附测定方法。本标准适用于出入境检验检疫工作中玉米、小麦、豆粕、棉柏等饲料原料及配合饲料和浓缩饲料中T-2毒素的初步筛选测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T20195—2006动物饲料试样的制备GB/T28718—2012饲料中T-2毒素的测定免疫亲和柱净化-高效液相色谱法NY/T2071—2011饲料中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的测定液相色谱-串联质谱法3方法提要本方法的测定是基于竞争性酶联免疫反应，用甲醇/水振荡提取试样中的T-2毒素。处理后试样中的T-2毒素与T-2毒素酶结合物竞争结合至包被在微孔板上的T-2毒素偶联抗原。通过洗涤除去微孔上未结合的T-2毒素与T-2毒素酶结合物，然后加入反应底物，用酶标仪测定450nm波长下吸光度，根据吸光度值得出试样中的T-2毒素含量。4试剂和材料4.1除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水符合GB/T6682二级水的规定。4.2T-2毒素酶联免疫试剂盒（参见附录A）。4.3甲醇。4.4氯化钠。4.5甲醇-水提取液：用甲醇和水以1∶1的比例配制成提取液备用。4.610%氯化钠溶液：称取10.0g氯化钠，加入100mL水溶解混匀。5仪器和设备5.1酶标仪：配备450nm滤光片。5.2分析天平：感量0.01g。5.3振荡器。5.4离心机。5.5培养箱。5.6单道微量移液器：20μL～200μL，100μL～1000μL。2SN/T5026—20175.7多通道微量移液器：50μL～300μL。5.8容量瓶：100mL。5.9聚苯乙烯离心管：2mL、50mL。6试样制备与保存6.1试神制备按GB/T20195—200...
