中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T5334.4—2020转基因植物产品的数字PCR检测方法第4部分:转基因油菜ProtocolofdigitalPCRforquantitativelydetectinggeneticallymodifiedplantsandtheirderivedproducts—Part4:Geneticallymodifiedcanola2020-12-30发布2021-07-01实施ICS65.020.01CCSB16中华人民共和国海关总署发布SN/T5334.4—2020前言SN/T5334—2020《转基因植物产品的数字PCR检测方法》分为8个部分:——第1部分:通用要求及定义;——第2部分:转基因大豆;——第3部分:转基因玉米;——第4部分:转基因油菜;——第5部分:转基因棉花;——第6部分:转基因马铃薯;——第7部分:转基因苜蓿;——第8部分:转基因甜菜。本文件为SN/T5334—2020的第4部分。本文件按照GB/T1.1—2020给出的规则起草。本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国深圳海关食品检验检疫技术中心、中华人民共和国上海海关、中华人民共和国拱北海关检验检疫技术中心。本文件主要起草人:潘广、李想、姚丽锋,蔡教英,凌杏园,王小玉,游淑珠。I1SN/T5334.4—2020转基因植物产品的数字PCR检测方法第4部分:转基因油菜1范围本文件规定了油菜中转基因品系数字PCR定量检测方法。本文件适用于油菜种子、叶片中11种转基因品系定量检测。本文件检测限参见附录A。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。SN/T5334.1转基因产品定量检测数字PCR方法第1部分:通用要求及定义3术语和定义SN/T5334.1界定的术语与定义适用于本文件。4原理见SN/T5334.1。5设备及试剂5.1内源基因和外源基因:内标准基因为油菜磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(PEP);外源序列为品系73496、T45、MON88302和OXY235外源基因插入位点5’端跨边界序列,以及品系Topas19/2、MS1、MS8、Rf1、Rf2、Rf3和RT73外源序列插入位点3’端跨边界序列。引物及探针序列参见附录A。5.2其他设备及试剂要求见SN/T5334.1的规定。6方法操作步骤6.1一般性操作步骤一般性操作步骤见SN/T5334.1的规定。6.2数字PCR反应体系6.2.1双通道数字PCR反应体系双通道数字PCR反应体系配制见表1。2SN/T5334.4—2020表1双通道数...