中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T5226—20192019-12-27发布2020-07-01实施中华人民共和国海关总署发布ICS67.120X04出口食品中鳖源性成分的检测实时荧光PCR法DetectionofTrionyxSinensisingredientinexportfood—Real-timerluorescentPCRmethodISN/T5226—2019前言本标准按照GB/T1.1—2009和GB/T20001.4—2002给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国郑州海关、中华人民共和国上海海关、中华人民共和国大连海关、中华人民共和国厦门海关。本标准主要起草人:苗丽、李想、张秀平、黄新新、郭德华、郑秋月、孔凡德、徐淑菲、黄世英、李志娟。1SN/T5226—2019出口食品中鳖源性成分的检测实时荧光PCR法1范围本标准规定了出口食品中鳖源性成分的实时荧光PCR检测方法。本标准仅适用于食品中中华鳖、黄沙鳖、黑鳖、珍珠鳖、山瑞鳖、刺鳖、小鳖、印度小头鳖和缅甸缘板鳖等鳖成分的定性检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB19489实验室生物安全通用要求GB/T27403—2008实验室质量控制规范食品分子生物学检测3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1鳖TrionyxSinensis是爬行纲龟鳖目鳖科鳖亚科的一类水陆两栖爬行动物。其肉营养丰富,是滋补佳品,同时鳖肉和鳖甲等也用作药材。3.2聚合酶链式反应polymerasechainreaction;PCR模板基因序列先经高温变性成为单链,在DNA聚合酶作用和适宜的反应条件下,根据模板序列设计的两条引物分别与模板DNA两条链上相应的一段互补序列发生退火而相互结合,接着在DNA聚合酶的作用下以四种脱氧核糖核酸(dNTP)为底物,使引物得以延伸,然后不断重复变性、退火和延伸这一循环,使欲扩增的基因片段以几何倍数扩增。3.3实时荧光PCRreal-timefluorescentPCR在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程。2SN/T5226—20193.4Ct值cyclethreshold每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数。4缩略语下列缩略语适用于本文件。DNA:deoxyribonuleicacid,脱氧核糖核酸。PCR:polymerasechainreaction,聚合酶链式反应。dNTP:deoxyribonuleosidetriphosp...