GB/T19167-2003前言传染性囊病(IBD)又名鸡传染性法氏囊病、腔上囊炎、甘布罗病，是由双RNA病毒科禽双RNA病毒属的传染性囊病病毒(IBDV)引起的鸡和火鸡的一种急性、高度接触传染性疫病本标准参考7世界动物卫生组织[WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OfficeInternationaldesEpizooties(法)，OIE」的《哺乳动物、禽、蜜蜂A和B类疾病诊断试验和疫苗标准手册》所推荐的方法。本标准的附录A为规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准由北京市农林科学院畜牧兽医研究所负责起草，由广西兽医研究所协作起草。本标准主要起草人:刘有昌、刘爵、周蛟、姚炜光、张方亮、贺荣莲、吴健敏、兰美益、黄红梅、蒋冬福、韦志锋。GB/T19167-2003传染性囊病诊断技术1范围本标准规定了传染性囊病病毒的病原分离、抗原的检测和检侧特异性抗体的琼脂凝胶免疫扩散试验、病毒血清微量中和试验、酶联免疫吸附试验的技术要求。本标准适用于传染性囊病的诊断与检疫。2病毒的分离及其鉴定2.1材料准备灭菌组织研磨器、离心机、370C温箱、孵化器、灭菌吸管、橡胶吸头、灭菌小瓶、灭菌6#针头、灭菌注射器、石蜡。2.2病料的采集和处理采集具有病变的新鲜法氏囊，用加有抗生素(3000IU/mL青霉素和3000pg/mL链霉素)的胰蛋白酶磷酸缓冲液或生理盐水制成20%的组织匀浆液，在37℃作用30min-60min,l500r/min离心20min，收集上清液。经菌检培养为阴性后作为接种材料。2.3鸡胚接种2.3.1接种将收集的上清液以每只0.2mL的量经绒毛尿囊膜接种9日龄^-11日龄无传染性囊病母源抗体鸡胚或SPF鸡胚(无特定病原体鸡胚)，接种后用石蜡封住接种孔。370C孵育，每天照蛋检查，弃去24h内死亡的鸡胚。2.3.2鸡胚剖检结果判定2.3.2.1标准IBDV分离物接种后判定:标准的IBDV分离物接种鸡胚后3d^-5d可致鸡胚死亡。死亡鸡胚充血，在羽毛囊、趾关节和大脑有血斑性出血。肝脏多可见坏死，也可见色淡似熟肉样。2.3.2.2IBDV变异株分离物接种后判定:IBDV变异株经绒毛尿囊膜接种鸡胚，一般不致死鸡胚，接种后5d^-6d剖检，可见鸡胚大脑和腹部皮下水肿、发育迟缓、呈灰白色或奶油色，肝脏常有胆汁着色或坏死，脾脏通常肿大2倍一3倍，但颜色无明显变化。2.4易感雏鸡接种试验2.4.1接种取2.2述及的病料上清液0.5mL，经点眼、口服感染5只14日龄^-21日龄无IBDV母源抗体鸡或SPF鸡。同时设健康对照组。接种3d后将鸡剖杀，检查法氏囊及脾脏。2.4.2剖检接种结果2.4.2.1标准...
