GBT 8622-2006 饲料用大豆制品中尿素酶活性的测定.pdf

ICS65.120B46中华人民共和国国家标准GB/T8622一2006代替GB/T8622一1988饲料用大豆制品中尿素酶活性的测定Determination of urease activity in soya bean products for feeds2006-06-09发布2006-09-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会发布GB/T8622-20066.2盐酸溶液c(HC1)=0.1mol/L移取8.3mL盐酸，用水稀释至1000mL。6.3氢氧化钠溶液c(NaOH)=0.1mol/L称取4g氢氧化钠溶于水并稀释至1000mL,按GB/T601规定的方法配制和标定。6.4甲基红、溴甲酚绿混合乙醇溶液称取0.1g甲基红，溶于95%乙醇并稀释至100mL,再称取0.5g溴甲酚绿，溶于95%乙醇并稀释至100mL,两种溶液等体积混合，储存于棕色瓶中。7试样的制备用粉碎机(5.1)将具有代表性的样品粉碎，使之全部通过样品筛(5.2)。对特殊样品（水分或挥发物含量较高而无法粉碎的样品)应先在实验室温度下进行预干燥，再进行粉碎，当计算结果时应将干燥失重计算在内。8测定步骤称取约0.2g制备好的试样（第7章），精确至0.1mg,于玻璃试管中（如活性很高可称0.05g试样)，加人10mL尿素缓冲液(6.1)，立即盖好试管盖剧烈振摇后，将试管马上置于30土0.5恒温水浴(5.4)中，计时保持30mi士10s。要求每个试样加入尿素缓冲液的时间间隔保持一致。停止反应时再以相同的时间间隔加入10mL盐酸溶液(6.2)，振摇后迅速冷却至20。将试管内容物全部转人小烧杯中，用20mL水冲洗试管数次，以氢氧化钠标准溶液(6.3)用酸度计(5.6)滴定至pH4.70。如果选择用指示剂，则将试管内容物全部转入250mL锥形瓶中加人8滴10滴混合指示剂(6.4)，以氢氧化钠标准溶液(6.3)滴定至溶液呈蓝绿色。另取试管作空白试验。称取约0.2g制备好的试样（第7章）精确至0.1mg,于玻璃试管中（如活性很高可称0.05g试样)，加入10mL盐酸溶液(G.2),振摇后再加入10mL尿素缓冲液(6.1)，立即盖好试管盖剧烈振摇，将试管马上置于30士0.5恒温水浴(5.4)中，计时保持30min士10s。停止反应时将试管迅速冷却至20。将试管内容物全部转入小烧杯中，用20mL水冲洗试管数次，以氢氧化钠标准溶液(6.3)用酸度计(5.6)滴定至pH4.70。如果选择用指示剂，则将试管内容物全部转入250mL锥形瓶中加人8滴10滴混合指示剂(6.4)，以氢氧化钠标淮溶液(6.3)滴定至溶液呈蓝绿色。9结果计算9.1大豆制品中尿素酶活性X,以尿素酶活性单位每克(U/g)表示，按式(1)计算。若试样经粉碎前的预于燥处理后，则按式(2)计算：X=14c(V-V(1）30Xmx=14xc。-2(1-S)(72）30m式中：X一一试样的尿素酶活性，单位为活性单位每克(U/g):c一氢氧化钠标准滴定溶液浓度，单位为摩尔每升(mol/L):V。一空白消耗氢氧化钠标准滴定溶液体积，单位为毫升(L)；V一试样消耗氢氧化钠标准滴定溶液体积，单位为毫升(mL);14一氮的摩尔质量，M(N2)=14g/mol:30一反应时间，单位为分钟(min);m一试样质量，单位为克(g):